Премини към съдържанието
KU812
Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
Хронична миелогенна левкемия, BCR-ABL1 позитивна
Синоними
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Документи

KU812

Cell line · Номер на продукта 305306

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия KU812 е човешка левкемична клетъчна линия, първоначално получена от пациент с хронична миелогенна левкемия (ХМЛ) във фаза на бластна криза. Тя се отличава със способността си да се диференцира в базофилни и еритроидни линии при специфични условия, което я прави ценен инструмент за изучаване на хемопоетичната диференциация и свързаните с нея злокачествени заболявания. Клетъчната линия проявява характеристики на базофилни прекурсори, включително наличие на метахроматични гранули, които са положителни за оцветяване в толуидиново синьо и астра синьо, и синтезира хистамин, което е показателно за базофилна активност.

Клетките KU812 са особено подходящи за изследване на псевдоалергията, свързана с активирането на комплемента (CARPA), и реакциите на свръхчувствителност, медиирани от базофили. Тази полезност се дължи на силния им отговор към протеините на комплемента като C3a и C5a, които предизвикват освобождаване на хистамин и други възпалителни медиатори, имитиращи псевдоалергични реакции. Клетките KU812 експресират маркери на клетъчната повърхност като CD63 и CD203c, които се свързват с базофилната активация и дегранулация. Тези маркери са използвани в протоколи, базирани на поточна цитометрия, за оценка на имунологичната съвместимост на наномедицински продукти и други биологични вещества.

Освен това клетките KU812 демонстрират потенциал за еритроидна диференциация, когато се култивират в условия на добавен еритропоетин. Това включва спонтанно съзряване в еритроидни клетки, способни да синтезират различни хемоглобини, като възрастни и фетални форми. Тези характеристики подчертават тяхната полезност за изучаване на еритропоезата заедно с базофилната диференциация, което превръща KU812 в универсален модел за хематологични изследвания.

Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
Хронична миелогенна левкемия, BCR-ABL1 позитивна
Синоними
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Лимфобластно-подобни
Тип клетка
Базофилна прогениторна клетка
Кариотип
Клетките съдържат поне една Ph1 (Филаделфийска) хромозома.

04Идентификатори

Източник
KU812 (каталожен номер 305306 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0379

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
CD3, ANPEP (CD13)
Мутационен профил
Мутация: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), хомозиготен; Сливане на гени: BCR-ABL, екзон 14 на BCR, слят с екзон 2 на ABL1 (транскрипт b3a2)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, добавете 2,5 g/L глюкоза и 10 mM HEPES
Пресаждане
Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно промийте прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (използвайте 3-5 ml за колби Т25 и 5-10 ml за колби Т75). Нанесете Accutase (1-2 ml за колби T25 и 2,5 ml за колби T75), като се уверите, че покрива изцяло клетъчния слой. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 10 минути. След инкубацията комбинирайте и центрофугирайте суспензията и адхезивните клетки. След центрофугирането внимателно ресуспендирайте клетъчната пелета и прехвърлете клетъчната суспензия в нови колби, съдържащи свежа среда.
Плътност на засяването
3 x 105 клетки/мл
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
38 години
Етническа принадлежност
Японски

10Подробности за продукта

Таблица със състава