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KU812
Tissue
外周血
Disease
慢性骨髓性白血病,BCR-ABL1 陽性
Synonyms
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Documents

KU812

Cell line · Product number 305306

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

KU812 細胞系是一種人類白血病細胞系,最初源自一名處於爆發性危機期的慢性骨髓性白血病(CML)患者。 該細胞系的顯著特徵在於,在特定條件下能夠分化為嗜鹼性與紅系細胞系,使其成為研究造血分化及相關惡性腫瘤的寶貴工具。 該細胞系展現出嗜鹼性前體細胞的特徵,包括存在對甲苯胺藍和阿斯特拉藍染色呈陽性的嗜鹼性顆粒,並且能合成組胺,這表明其具有嗜鹼性活性。

KU812 細胞在研究補體活化相關假性過敏(CARPA)以及由嗜鹼性粒細胞介導的超敏反應方面尤為重要。其用途源於該細胞對 C3a 和 C5a 等補體蛋白的強烈反應,這些蛋白會觸發組胺及其他發炎介質的釋放,從而模擬假性過敏反應。 KU812 細胞表達 CD63 和 CD203c 等細胞表面標記物,這些標記物與嗜鹼性細胞的活化及脫顆粒有關。這些標記物已被應用於基於流式細胞術的實驗方案中,用以評估納米藥物及其他生物製劑的免疫相容性。

此外,當在添加促紅細胞生成素的培養條件下培養時,KU812 細胞會展現紅系分化潛能。 這包括自發性成熟為紅系細胞,並能合成各種血紅蛋白,例如成人型和胎兒型。這些特徵凸顯了其在研究造血及嗜鹼性分化方面的實用性,使 KU812 成為血液學研究中一種多功能的模型。

Tissue
外周血
Disease
慢性骨髓性白血病,BCR-ABL1 陽性
Synonyms
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
淋巴母細胞樣
Cell type
嗜鹼性前體細胞
Karyotype
這些細胞至少含有一條 Ph1(費城)染色體。

04Identifiers

Citation
KU812(Cytion 型號 305306)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD3、ANPEP(CD13)
Mutational profile
突變:TP53,p.Lys132Arg (c.395A>G),純合子;基因融合:BCR-ABL,BCR 第 14 外顯子與 ABL1 第 2 外顯子融合(b3a2 轉錄本)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS,並添加 2.5 g/L 葡萄糖及 10 mM HEPES
Subculturing
將懸浮細胞收集至 15 毫升試管中,並用不含鈣和鎂的 PBS 輕柔地洗滌貼壁細胞(T25 培養瓶使用 3-5 毫升,T75 培養瓶使用 5-10 毫升)。 加入 Accutase(T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶使用 2.5 毫升),確保完全覆蓋細胞層。讓細胞於室溫下孵育 10 分鐘。 孵育完成後,將懸浮細胞與貼壁細胞合併並進行離心。離心後,小心地將細胞沉澱重新懸浮,並將細胞懸液轉移至裝有新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
3 × 105 個細胞/毫升
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
38年
Ethnicity
日文

10Product details

Composition table