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KU812
Tissue
外周血
Disease
慢性骨髓性白血病,BCR-ABL1 阳性
Synonyms
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Documents

KU812

Cell line · Product number 305306

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

KU812 细胞系是一种人类白血病细胞系,最初来源于一名处于爆发期的慢性髓性白血病(CML)患者。它的显著特点是能在特定条件下分化成嗜碱性和红细胞系,是研究造血分化和相关恶性肿瘤的重要工具。该细胞系具有嗜碱性前体的特征,包括存在甲苯胺蓝和星光蓝染色阳性的变色颗粒,并能合成组胺,表明具有嗜碱性活性。

KU812 细胞尤其适用于研究补体活化相关假性过敏(CARPA)和由嗜碱性粒细胞介导的超敏反应。这种作用源于它们对补体蛋白(如 C3a 和 C5a)的强烈反应,补体蛋白会引发组胺和其他炎症介质的释放,从而模拟假性过敏反应。KU812 细胞表达 CD63 和 CD203c 等细胞表面标记物,这些标记物与嗜碱性粒细胞活化和脱颗粒有关。这些标记已被用于基于流式细胞仪的方案中,以评估纳米药物和其他生物制剂的免疫兼容性。

此外,KU812 细胞在补充促红细胞生成素的条件下培养时具有红细胞分化潜能。这包括自发成熟为能够合成各种血红蛋白的红细胞,如成人型和胎儿型红细胞。这些特点突出了 KU812 在研究红细胞生成和嗜碱性粒细胞分化方面的实用性,使其成为血液学研究的多功能模型。

Tissue
外周血
Disease
慢性骨髓性白血病,BCR-ABL1 阳性
Synonyms
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
淋巴母细胞样
Cell type
嗜碱性粒细胞祖细胞
Karyotype
这些细胞至少含有一条 Ph1(费城)染色体。

04Identifiers

Citation
KU812(Cytion 目录编号 305306)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD3、安培(CD13)
Mutational profile
突变:TP53,p.Lys132Arg (c.395A>G),同基因;基因融合:BCR-ABL,BCR 第 14 号外显子与 ABL1 第 2 号外显子融合(b3a2 转录本)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS,并加入 2.5 g/L 葡萄糖和 10 mM HEPES
Subculturing
将悬浮细胞收集到 15 毫升试管中,用不含钙和镁的 PBS(T25 烧瓶用 3-5 毫升,T75 烧瓶用 5-10 毫升)轻轻清洗粘附的细胞。涂抹 Accutase(T25 烧瓶 1-2 毫升,T75 烧瓶 2.5 毫升),确保完全覆盖细胞层。让细胞在室温下孵育 10 分钟。孵育后,将悬浮细胞和粘附细胞混合并离心。离心后,小心重悬细胞团,并将细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
3 × 10⁵ 个细胞/毫升
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Donor age
38 年
Ethnicity
日语

10Product details

Composition table