
- Tkáň
- Periferní krev
- Nemoc
- Chronická myelogenní leukémie, BCR-ABL1 pozitivní
- Synonyma
- Ku812, KU-812, KU.812, KU 812
Dokumenty
KU812
Cell line · Číslo výrobku 305306
Přizpůsobení / Doporučení
- KU812Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie KU812 je lidská leukemická buněčná linie původně získaná od pacienta s chronickou myelogenní leukémií (CML) ve fázi blastické krize. Vyniká schopností diferencovat se za specifických podmínek do bazofilní a erytroidní linie, což z ní činí cenný nástroj pro studium diferenciace krvetvorby a souvisejících malignit. Buněčná linie vykazuje znaky bazofilních prekurzorů, včetně přítomnosti metachromatických granulí, které jsou pozitivní na barvení toluidinovou modří a astra modří, a syntetizuje histamin, což svědčí o bazofilní aktivitě.
Buňky KU812 jsou zvláště důležité při zkoumání pseudoalergie související s aktivací komplementu (CARPA) a reakcí přecitlivělosti zprostředkovaných bazofily. Tato užitečnost vyplývá z jejich silné reakce na proteiny komplementu, jako jsou C3a a C5a, které spouštějí uvolňování histaminu a dalších zánětlivých mediátorů a napodobují pseudoalergické reakce. Buňky KU812 exprimují povrchové buněčné markery, jako jsou CD63 a CD203c, které jsou spojeny s bazofilní aktivací a degranulací. Tyto markery byly použity v protokolech založených na průtokové cytometrii k hodnocení imunologické kompatibility nanomedicín a jiných biologických látek.
Buňky KU812 navíc vykazují potenciál erytroidní diferenciace, pokud jsou kultivovány v podmínkách s přídavkem erytropoetinu. To zahrnuje spontánní zrání v erytroidní buňky schopné syntetizovat různé hemoglobiny, například dospělé a fetální formy. Tyto vlastnosti podtrhují jejich užitečnost při studiu erytropoézy spolu s bazofilní diferenciací, což z KU812 činí univerzální model pro hematologický výzkum.
- Tkáň
- Periferní krev
- Nemoc
- Chronická myelogenní leukémie, BCR-ABL1 pozitivní
- Synonyma
- Ku812
- KU-812
- KU.812
- KU 812
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Odpružení
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Lymfoblastům podobné
- Typ buňky
- Bazofilní progenitorové buňky
- Karyotyp
- Buňky obsahují alespoň jeden Ph1 (filadelfský) chromozom.
04Identifikátory
- Citace
- KU812 (katalogové číslo Cytion 305306)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0379
05Exprese a náchylnost
- Exprese antigenu
- CD3, ANPEP (CD13)
- Mutační profil
- Mutace: Lys132Arg (c.395A>G), homozygotní; genová fúze: BCR-ABL, BCR exon 14 fúzovaný s ABL1 exonem 2 (b3a2 transkript)
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium 10% FBS, přidejte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
- Subkultivace
- Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 3 x 105 buněk/ml
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 38 let
- Etnická příslušnost
- Japonský
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
10Podrobnosti o produktu
- Tabulka složení