Přejít na obsah
KU812
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Chronická myelogenní leukémie, BCR-ABL1 pozitivní
Synonyma
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Dokumenty

KU812

Cell line · Číslo výrobku 305306

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie KU812 je lidská leukemická buněčná linie původně získaná od pacienta s chronickou myelogenní leukémií (CML) ve fázi blastické krize. Vyniká schopností diferencovat se za specifických podmínek do bazofilní a erytroidní linie, což z ní činí cenný nástroj pro studium diferenciace krvetvorby a souvisejících malignit. Buněčná linie vykazuje znaky bazofilních prekurzorů, včetně přítomnosti metachromatických granulí, které jsou pozitivní na barvení toluidinovou modří a astra modří, a syntetizuje histamin, což svědčí o bazofilní aktivitě.

Buňky KU812 jsou zvláště důležité při zkoumání pseudoalergie související s aktivací komplementu (CARPA) a reakcí přecitlivělosti zprostředkovaných bazofily. Tato užitečnost vyplývá z jejich silné reakce na proteiny komplementu, jako jsou C3a a C5a, které spouštějí uvolňování histaminu a dalších zánětlivých mediátorů a napodobují pseudoalergické reakce. Buňky KU812 exprimují povrchové buněčné markery, jako jsou CD63 a CD203c, které jsou spojeny s bazofilní aktivací a degranulací. Tyto markery byly použity v protokolech založených na průtokové cytometrii k hodnocení imunologické kompatibility nanomedicín a jiných biologických látek.

Buňky KU812 navíc vykazují potenciál erytroidní diferenciace, pokud jsou kultivovány v podmínkách s přídavkem erytropoetinu. To zahrnuje spontánní zrání v erytroidní buňky schopné syntetizovat různé hemoglobiny, například dospělé a fetální formy. Tyto vlastnosti podtrhují jejich užitečnost při studiu erytropoézy spolu s bazofilní diferenciací, což z KU812 činí univerzální model pro hematologický výzkum.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Chronická myelogenní leukémie, BCR-ABL1 pozitivní
Synonyma
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
Bazofilní progenitorové buňky
Karyotyp
Buňky obsahují alespoň jeden Ph1 (filadelfský) chromozom.

04Identifikátory

Citace
KU812 (katalogové číslo Cytion 305306)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
CD3, ANPEP (CD13)
Mutační profil
Mutace: Lys132Arg (c.395A>G), homozygotní; genová fúze: BCR-ABL, BCR exon 14 fúzovaný s ABL1 exonem 2 (b3a2 transkript)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10% FBS, přidejte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
Subkultivace
Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Hustota výsevu
3 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
38 let
Etnická příslušnost
Japonský

10Podrobnosti o produktu

Tabulka složení