Gå direkt till innehållet
KU812
Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Kronisk myelogen leukemi, BCR-ABL1-positiv
Synonymer
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

KU812

Cell line · Produktnummer 305306

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen KU812 är en human leukemisk cellinje som ursprungligen härrör från en patient med kronisk myeloisk leukemi (KML) i den blastiska krisfasen. Den är anmärkningsvärd för sin förmåga att differentiera till basofila och erytroida linjer under specifika förhållanden, vilket gör den till ett värdefullt verktyg för att studera hematopoetisk differentiering och relaterade maligniteter. Cellinjen uppvisar egenskaper hos basofila prekursorer, inklusive förekomsten av metakromatiska granula som är positiva för färgning med toluidinblått och astrablått, och den syntetiserar histamin, vilket indikerar basofil aktivitet.

KU812-celler är särskilt relevanta för att undersöka komplementaktiveringsrelaterad pseudoallergi (CARPA) och överkänslighetsreaktioner som förmedlas av basofiler. Denna användbarhet beror på deras robusta respons på komplementproteiner som C3a och C5a, som utlöser frisättning av histamin och andra inflammatoriska mediatorer, vilket efterliknar pseudoallergiska reaktioner. KU812-celler uttrycker markörer på cellytan, t.ex. CD63 och CD203c, som är associerade med basofil aktivering och degranulering. Dessa markörer har använts i flödescytometribaserade protokoll för att utvärdera den immunologiska kompatibiliteten hos nanomediciner och andra biologiska läkemedel.

Dessutom uppvisar KU812-cellerna erytroid differentieringspotential när de odlas under förhållanden med erytropoietintillskott. Detta inkluderar spontan mognad till erytroida celler som kan syntetisera olika hemoglobiner, såsom adulta och fetala former. Dessa egenskaper understryker deras användbarhet för att studera erytropoies tillsammans med basofil differentiering, vilket gör KU812 till en mångsidig modell för hematologisk forskning.

Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Kronisk myelogen leukemi, BCR-ABL1-positiv
Synonymer
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastliknande
Celltyp
Basofil progenitorcell
Karyotyp
Cellerna innehåller minst en Ph1 (Philadelphia)-kromosom.

04Identifierare

Källa
KU812 (Cytion katalognummer 305306)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0379

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
CD3, ANPEP (CD13)
Mutationsprofil
Mutation: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), homozygot; Genfusion: BCR-ABL, BCR exon 14 fusionerad med ABL1 exon 2 (b3a2-transkript)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS, tillsätt 2,5 g/L glukos och 10 mM HEPES
Vidareodling
Samla de suspenderade cellerna i ett 15 ml rör och tvätta försiktigt de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (använd 3-5 ml för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar). Applicera Accutase (1-2 ml för T25-kolvar, 2,5 ml för T75-kolvar) och se till att cellskiktet täcks helt. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Efter inkubationen, kombinera och centrifugera både suspensionen och de vidhäftande cellerna. Efter centrifugering, resuspendera försiktigt cellpelleten och överför cellsuspensionen till nya kolvar med nytt medium.
Såtäthet
3 x 105 celler/ml
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
38 år
Etnicitet
Japanska

10Produktinformation

Sammansättningstabell