Перейти до вмісту
KU812
Тканина
Периферична кров
Хвороба
Хронічна мієлогенна лейкемія, BCR-ABL1 позитивний
Синоніми
Ku812, KU-812, KU.812, KU 812

Документи

KU812

Cell line · Номер товару 305306

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія KU812 - це лейкемічні клітини людини, отримані від пацієнта з хронічною мієлогенною лейкемією (ХМЛ) у фазі бластного кризу. Вона відрізняється здатністю диференціюватися в базофільну та еритроїдну лінії за певних умов, що робить її цінним інструментом для вивчення гемопоетичної диференціації та пов'язаних з нею злоякісних новоутворень. Клітинна лінія має характеристики базофільних попередників, включаючи наявність метахроматичних гранул, які позитивно забарвлюються толуїдиновим синім і астра синім, а також синтезує гістамін, що свідчить про базофільну активність.

Клітини KU812 особливо актуальні для дослідження псевдоалергії, пов'язаної з активацією комплементу (CARPA), та реакцій гіперчутливості, опосередкованих базофілами. Це зумовлено їхньою потужною реакцією на білки комплементу, такі як C3a і C5a, які викликають вивільнення гістаміну та інших медіаторів запалення, імітуючи псевдоалергічні реакції. Клітини KU812 експресують маркери клітинної поверхні, такі як CD63 і CD203c, які пов'язані з базофільною активацією і дегрануляцією. Ці маркери використовуються в протокольній цитофлуориметрії для оцінки імунологічної сумісності нанопрепаратів та інших біологічних препаратів.

Крім того, клітини KU812 демонструють потенціал еритроїдного диференціювання при культивуванні в умовах, доповнених еритропоетином. Це включає спонтанне дозрівання в еритроїдні клітини, здатні синтезувати різні гемоглобіни, такі як дорослі та ембріональні форми. Ці особливості підкреслюють їх корисність у вивченні еритропоезу поряд з базофільною диференціацією, що робить KU812 універсальною моделлю для гематологічних досліджень.

Тканина
Периферична кров
Хвороба
Хронічна мієлогенна лейкемія, BCR-ABL1 позитивний
Синоніми
  • Ku812
  • KU-812
  • KU.812
  • KU 812

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Підвіска
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Лімфобластоподібні
Тип клітини
Клітина-попередник базофілів
Каріотип
Клітини містять принаймні одну Ph1 (філадельфійську) хромосому.

04Ідентифікатори

Посилання
KU812 (каталожний номер 305306)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0379

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
CD3, ANPEP (CD13)
Профіль мутацій
Мутація: TP53, p.Lys132Arg (c.395A>G), гомозиготний; злиття генів: BCR-ABL, екзон 14 BCR злитий з екзоном 2 ABL1 (транскрипт b3a2)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Поповніть середовище 10% FBS, додайте 2,5 г/л глюкози та 10 мМ HEPES
Пересадка в нове середовище
Зберіть суспензію клітин у пробірку на 15 мл і обережно відмийте прилиплі клітини PBS, що не містить кальцію і магнію (використовуйте 3-5 мл для колб T25 і 5-10 мл для колб T75). Нанесіть аккутазу (1-2 мл для колб Т25, 2,5 мл для колб Т75), забезпечуючи повне покриття клітинного шару. Інкубуйте клітини при кімнатній температурі протягом 10 хвилин. Після інкубації об'єднайте і центрифугуйте суспензію і прилиплі клітини. Після центрифугування обережно ресуспендуйте клітинну гранулу і перенесіть клітинну суспензію в нові колби зі свіжим середовищем.
Щільність висіву
3 x 105 клітин/мл
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
38 років
Етнічна приналежність
Японський

10Детальна інформація про товар

Таблиця складу