TC-1

TC-1 הוא קו תאים אפיתל ריאתי עכברי שעבר טרנספורמציה עם אונקוגנים E6 ו-E7 של נגיף הפפילומה האנושי מסוג 16 (HPV16), יחד עם אונקוגן H-ras מופעל. קו התאים פותח מתאי אפיתל ריאתי ראשוניים של עכברי C57BL/6 באמצעות אסטרטגיה של העברה רטרו-ויראלית כפולה. בתחילה, וקטור רטרו-ויראלי שמקורו בנגיף לוקמיה עכברי Moloney (MoMLV), כגון pLXSN-16E6E7, שימש להעברת אונקוגנים E6 ו-E7. בוקטור זה, הגנים מבוטאים מהמקדם הוויראלי 5′ LTR, וגנים עמידים לניאומיצין (Neo^R) תחת בקרת מקדם SV40 פנימי אפשרו בחירה עם G418. ביטוי יציב של E6 ו-E7 מביא להשבחת מסלולי מדכאי הגידול p53 ו-Rb, מה שמוביל להנצחת התאים.

לאחר הבחירה הראשונית, הוכנס וקטור רטרו-ויראלי שני מבוסס MoMLV המקודד גן H-ras (G12V) מופעל כדי להשלים את הטרנספורמציה. וקטור זה נשא סמן ברירה שונה, בדרך כלל גן עמיד להיגרומיצין (hph), המונע על ידי פרומוטור פנימי כגון SV40 או PGK. תאים ששרדו ברירה רציפה עם G418 והיגרומיצין הפגינו שילוב יציב של שלושת האונקוגנים, מה שהביא לתאים TC-1 שעברו טרנספורמציה מלאה והפכו לבלתי מוות.

במחקרים תפקודיים, תאי TC-1 מפגינים ביטוי חזק של מולקולות MHC מסוג I, מה שהופך אותם לאימונוגניים ביותר ומשמשים רבות להערכת חיסונים ניסיוניים וטיפולים אימונולוגיים המכוונים לממאירויות הקשורות ל-HPV. הם שימשו ככלי עזר במחקרים פרה-קליניים על חיסונים, במיוחד אלה שמטרתם לעורר תגובות של תאי T ^מסוג CD8⁺ נגד HPV16 E7. בנוסף, פותחו תת-קווים עם ביטוי MHC class I מופחת כדי לחקות מנגנוני בריחה חיסונית, מה שמספק תובנות נוספות על האינטראקציה בין תאי הגידול לבין החיסון של המארח. תכונות אלה הופכות את TC-1 למודל חזק ורב-תכליתי לפיתוח אימונו-אונקולוגיה וחיסונים נגד HPV.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו