TC-1

TC-1 是一種經由人類乳突病毒第 16 型（HPV16）E6 和 E7 致癌基因，以及活化型 H-ras 致癌基因轉化而成的鼠肺上皮細胞系。 該細胞系是利用雙重逆轉錄病毒轉導策略，從 C57BL/6 小鼠的原代肺上皮細胞開發而來。 最初，使用源自莫洛尼小鼠白血病病毒（MoMLV）的逆轉錄病毒載體（例如 pLXSN-16E6E7）來傳遞 E6 和 E7 致癌基因。 在此載體中，基因由病毒 5′ LTR 啟動子表達，而受內部 SV40 啟動子控制的新黴素抗性基因 (Neo^R) 則使細胞能夠透過 G418 進行篩選。 E6 和 E7 的穩定表達會導致 p53 和 Rb 腫瘤抑制因子的通路失活，從而促使細胞永生化。

初步篩選後，引入第二個基於 MoMLV 的逆轉錄病毒載體，該載體編碼活化的 H-ras (G12V) 基因，以完成轉化。 該載體攜帶不同的可篩選標記，通常為由 SV40 或 PGK 等內部啟動子驅動的潮黴素抗性基因 (hph)。經 G418 和潮黴素連續篩選後存活的細胞，顯示出這三種致癌基因均已穩定整合，從而產生完全轉化且不朽化的 TC-1 細胞。

在功能研究中，TC-1細胞展現出強烈的MHC第一類分子表達，使其具有高度免疫原性，並被廣泛用於評估針對HPV相關惡性腫瘤的實驗性疫苗及免疫療法。這些細胞在疫苗的臨床前研究中發揮了關鍵作用，特別是針對誘導針對HPV16 E7^的CD8⁺ T細胞反應的研究。 此外，研究人員還開發出 MHC I 類分子表達下調的亞系，用以模擬免疫逃逸機制，從而深入了解腫瘤細胞與宿主免疫系統之間的相互作用。這些特性使 TC-1 成為免疫腫瘤學及 HPV 疫苗開發中既可靠又多用途的模型。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。