TC-1

TC-1 adalah garis sel epitel paru tikus yang diubah secara genetik dengan gen onkogen E6 dan E7 dari virus papilloma manusia tipe 16 (HPV16), serta gen onkogen H-ras yang diaktifkan. Baris sel ini dikembangkan dari sel epitel paru primer tikus C57BL/6 menggunakan strategi transduksi retrovirus ganda. Awalnya, vektor retrovirus yang berasal dari virus leukemia tikus Moloney (MoMLV), seperti pLXSN-16E6E7, digunakan untuk mengantarkan gen onkogen E6 dan E7. Dalam vektor ini, gen-gen tersebut diekspresikan dari promotor 5′ LTR virus, dan gen resistensi neomisin (Neo^R) yang dikendalikan oleh promotor SV40 internal memungkinkan seleksi dengan G418. Ekspresi stabil E6 dan E7 menyebabkan inaktivasi jalur penekan tumor p53 dan Rb, yang mendorong immortalisasi sel.

Setelah seleksi awal, vektor retrovirus berbasis MoMLV yang mengekspresikan gen H-ras yang diaktifkan (G12V) diperkenalkan untuk menyelesaikan transformasi. Vektor ini membawa penanda seleksi yang berbeda, biasanya gen resistensi hygromycin (hph), yang dikendalikan oleh promotor internal seperti SV40 atau PGK. Sel yang bertahan melalui seleksi berurutan dengan G418 dan hygromycin menunjukkan integrasi stabil dari ketiga onkogen, menghasilkan sel TC-1 yang sepenuhnya tertransformasi dan abadi.

Dalam studi fungsional, sel TC-1 menunjukkan ekspresi kuat molekul MHC kelas I, menjadikannya sangat imunogenik dan sering digunakan untuk mengevaluasi vaksin eksperimental dan imunoterapi yang menargetkan neoplasma terkait HPV. Sel ini telah berperan penting dalam studi vaksin praklinis, terutama yang bertujuan memicu respons sel T CD8⁺ terhadap HPV16 E7. Selain itu, subline dengan ekspresi MHC kelas I yang diturunkan telah dikembangkan untuk meniru mekanisme pelarian imun, memberikan wawasan tambahan tentang interaksi antara sel tumor dan imunitas tuan rumah. Sifat-sifat ini menjadikan TC-1 model yang kokoh dan serbaguna untuk imunoonkologi dan pengembangan vaksin HPV.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami