Премини към съдържанието
NCI-H1650
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Минимално инвазивен аденокарцином на белия дроб
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Документи

NCI-H1650

Cell line · Номер на продукта 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия NCI-H1650 е получена от човешки недребноклетъчен белодробен карцином (НДКБК), по-специално аденокарцином, и се използва широко в изследванията на рака поради отличителния си генетичен профил и значението ѝ за тестване на лекарства. Тази клетъчна линия се характеризира с мутации в ключови онкогенни и туморно-супресорни пътища, включително делеция в гена PTEN и активираща мутация в EGFR. Тези генетични промени правят NCI-H1650 подходящ модел за изучаване на механизмите на туморогенеза и терапевтична резистентност при NSCLC, особено в контекста на целеви терапии, насочени към сигналния път EGFR.

Изтриването на PTEN в NCI-H1650 води до загуба на фосфатазна активност, което дерегулира сигналния път PI3K/AKT, допринасяйки за туморната прогресия и резистентността към определени терапевтични средства. Активиращата мутация на EGFR, която често се наблюдава при белодробния аденокарцином, прави клетъчната линия особено чувствителна към тирозин киназни инхибитори като ерлотиниб. Съвместната поява на тези генетични промени обаче често налага комбинирани терапии за преодоляване на адаптивните механизми на резистентност, които включват компенсаторни сигнални пътища, като mTOR или MET.

В допълнение към своите генетични и сигнални характеристики NCI-H1650 е включен в многобройни проучвания, изследващи соматични мутации, вариации в броя на копията и епигенетични промени в ракови клетъчни линии. Реакцията му към инхибитори на пътищата EGFR и PI3K подчертава неговата полезност в предклиничните стратегии за откриване на лекарства и персонализираната медицина. Тази клетъчна линия служи като представителен модел за изследване на взаимодействието между онкогенните фактори и терапевтичните уязвимости при белодробния аденокарцином.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Минимално инвазивен аденокарцином на белия дроб
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален

04Идентификатори

Източник
NCI-H1650 (каталожен номер 305059 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1483

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
27 години
Етническа принадлежност
Европейски