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NCI-H1650
Gewebe
Lunge
Krankheit
Minimalinvasives Adenokarzinom der Lunge
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

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NCI-H1650

Cell line · Artikelnummer 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie NCI-H1650 stammt von einem menschlichen nicht-kleinzelligen Lungenkarzinom (NSCLC), insbesondere einem Adenokarzinom, und wird aufgrund ihres besonderen genetischen Profils und ihrer Bedeutung für die Arzneimittelprüfung häufig in der Krebsforschung eingesetzt. Diese Zelllinie weist Mutationen in wichtigen onkogenen und tumorsuppressiven Signalwegen auf, darunter eine Deletion im PTEN-Gen und eine aktivierende Mutation im EGFR. Diese genetischen Veränderungen machen NCI-H1650 zu einem geeigneten Modell für die Untersuchung der Mechanismen der Tumorentstehung und der Therapieresistenz bei NSCLC, insbesondere im Zusammenhang mit gezielten Therapien, die auf den EGFR-Signalweg abzielen.

Die Deletion von PTEN in NCI-H1650 führt zum Verlust der Phosphataseaktivität, wodurch der PI3K/AKT-Signalweg dereguliert wird, was zur Tumorprogression und zur Resistenz gegenüber bestimmten Therapeutika beiträgt. Die aktivierende EGFR-Mutation, die häufig bei Lungenadenokarzinomen beobachtet wird, macht die Zelllinie besonders empfindlich gegenüber Tyrosinkinase-Inhibitoren wie Erlotinib. Das gleichzeitige Auftreten dieser genetischen Veränderungen macht jedoch häufig Kombinationstherapien erforderlich, um adaptive Resistenzmechanismen zu überwinden, die kompensatorische Signalwege wie mTOR oder MET einbeziehen.

Zusätzlich zu seinen genetischen und signaltechnischen Eigenschaften wurde NCI-H1650 in zahlreiche Studien einbezogen, in denen somatische Mutationen, Kopienzahlvariationen und epigenetische Veränderungen in Krebszelllinien untersucht wurden. Ihr Ansprechen auf EGFR- und PI3K-Inhibitoren unterstreicht ihre Nützlichkeit für die präklinische Arzneimittelforschung und Strategien der personalisierten Medizin. Diese Zelllinie dient als repräsentatives Modell für die Untersuchung des Zusammenspiels zwischen onkogenen Faktoren und therapeutischen Schwachstellen bei Lungenadenokarzinomen.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Minimalinvasives Adenokarzinom der Lunge
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H1650 (Cytion-Katalognummer 305059)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
27 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch