Przejdź do treści
NCI-H1650
Chusteczka
Płuco
Choroba
Minimalnie inwazyjny gruczolakorak płuca
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Dokumenty

NCI-H1650

Cell line · Numer produktu 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NCI-H1650 pochodzi z ludzkiego niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC), w szczególności gruczolakoraka, i jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem ze względu na swój charakterystyczny profil genetyczny i znaczenie w testowaniu leków. Ta linia komórkowa zawiera mutacje w kluczowych szlakach onkogennych i supresorowych nowotworów, w tym delecję w genie PTEN i aktywującą mutację w EGFR. Te zmiany genetyczne sprawiają, że NCI-H1650 jest odpowiednim modelem do badania mechanizmów nowotworzenia i oporności terapeutycznej w NSCLC, zwłaszcza w kontekście terapii celowanych ukierunkowanych na szlak sygnałowy EGFR.

Delecja PTEN w NCI-H1650 skutkuje utratą aktywności fosfatazy, która dereguluje szlak sygnałowy PI3K/AKT, przyczyniając się do progresji nowotworu i oporności na niektóre środki terapeutyczne. Aktywująca mutacja EGFR, powszechnie obserwowana w gruczolakoraku płuc, czyni tę linię komórkową szczególnie wrażliwą na inhibitory kinazy tyrozynowej, takie jak erlotynib. Jednak współwystępowanie tych zmian genetycznych często wymaga terapii skojarzonych w celu przezwyciężenia mechanizmów oporności adaptacyjnej, które obejmują kompensacyjne szlaki sygnałowe, takie jak mTOR lub MET.

Oprócz cech genetycznych i sygnalizacyjnych, NCI-H1650 został włączony do licznych badań analizujących mutacje somatyczne, zmiany liczby kopii i zmiany epigenetyczne w liniach komórek nowotworowych. Jego odpowiedź na inhibitory szlaków EGFR i PI3K podkreśla jego użyteczność w przedklinicznym odkrywaniu leków i strategiach medycyny spersonalizowanej. Ta linia komórkowa służy jako reprezentatywny model do badania interakcji między czynnikami onkogennymi a słabościami terapeutycznymi w gruczolakoraku płuc.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Minimalnie inwazyjny gruczolakorak płuca
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
NCI-H1650 (numer katalogowy Cytion 305059)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
27 lat
Pochodzenie etniczne
Europejski