Preskoči na vsebino
NCI-H1650
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Minimalno invazivni pljučni adenokarcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Dokumenti

NCI-H1650

Cell line · Številka izdelka 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija NCI-H1650 izhaja iz človeškega nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma (NSCLC), zlasti adenokarcinoma, in se pogosto uporablja pri raziskavah raka zaradi svojega značilnega genetskega profila in pomena za testiranje zdravil. Ta celična linija ima mutacije v ključnih onkogenih in tumorskih supresorskih poteh, vključno z delecijo v genu PTEN in aktivacijsko mutacijo v EGFR. Zaradi teh genetskih sprememb je NCI-H1650 primeren model za preučevanje mehanizmov tumorigeneze in odpornosti na terapijo pri NSCLC, zlasti v okviru ciljnih terapij, usmerjenih na signalno pot EGFR.

Zaradi delecije PTEN v NCI-H1650 se izgubi aktivnost fosfataze, kar deregulira signalno pot PI3K/AKT, kar prispeva k napredovanju tumorja in odpornosti na nekatera terapevtska sredstva. Zaradi aktivacijske mutacije EGFR, ki je pogosta pri pljučnem adenokarcinomu, je celična linija še posebej občutljiva na inhibitorje tirozin kinaz, kot je erlotinib. Vendar je zaradi sočasnega pojavljanja teh genetskih sprememb pogosto potrebna kombinirana terapija za premagovanje mehanizmov prilagodljive odpornosti, ki vključujejo kompenzacijske signalne poti, kot sta mTOR ali MET.

Poleg genetskih in signalnih značilnosti je bil NCI-H1650 vključen v številne študije, ki so preučevale somatske mutacije, spremembe števila kopij in epigenetske spremembe v rakavih celičnih linijah. Njegov odziv na zaviralce poti EGFR in PI3K poudarja njegovo uporabnost pri predkliničnem odkrivanju zdravil in strategijah personalizirane medicine. Ta celična linija služi kot reprezentativni model za raziskovanje medsebojnega vpliva onkogenih dejavnikov in terapevtskih ranljivosti pri pljučnem adenokarcinomu.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Minimalno invazivni pljučni adenokarcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H1650 (kataloška številka Cytion 305059)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
27 let
Etnična pripadnost
Evropski