Pāriet uz saturu
NCI-H1650
Audums
Plaušas
Slimība
Minimāli invazīva plaušu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Dokumenti

NCI-H1650

Cell line · Preces numurs 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H1650 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka plaušu karcinomas, kas nav mazo šūnu plaušu karcinoma (NSCLC), īpaši adenokarcinomas, un to plaši izmanto vēža pētījumos, jo tai ir atšķirīgs ģenētiskais profils un tā ir svarīga zāļu testēšanā. Šai šūnu līnijai ir mutācijas galvenajos onkogēnajos un audzēju nomācošajos ceļos, tostarp PTEN gēna delecija un EGFR aktivējošā mutācija. Šīs ģenētiskās izmaiņas padara NCI-H1650 par piemērotu modeli NSCLC audzēju veidošanās mehānismu un terapeitiskās rezistences izpētei, jo īpaši saistībā ar mērķterapiju, kas vērsta uz EGFR signalizācijas ceļu.

PTEN izdzēšana NCI-H1650 izraisa fosfatāzes aktivitātes zudumu, kas deregulē PI3K/AKT signalizācijas ceļu, veicinot audzēja progresēšanu un rezistenci pret noteiktiem terapeitiskiem līdzekļiem. Aktivējošā EGFR mutācija, kas bieži novērota plaušu adenokarcinomā, padara šūnu līniju īpaši jutīgu pret tādiem tirozīnkināzes inhibitoriem kā erlotinibs. Tomēr šo ģenētisko izmaiņu līdzāspastāvēšanas dēļ bieži vien ir nepieciešama kombinēta terapija, lai pārvarētu adaptīvās rezistences mehānismus, kas ietver kompensējošos signālu ceļus, piemēram, mTOR vai MET.

Papildus NCI-H1650 ģenētiskajām un signālu īpašībām tā ir iekļauta daudzos pētījumos, kuros pētītas somatiskās mutācijas, kopiju skaita variācijas un epigenētiskās izmaiņas vēža šūnu līnijās. Tās reakcija uz EGFR un PI3K ceļu inhibitoriem uzsver tās lietderību preklīniskajā zāļu atklāšanā un personalizētās medicīnas stratēģijās. Šī šūnu līnija kalpo kā reprezentatīvs modelis, lai pētītu onkogēno ierosinātāju un terapeitisko ievainojamību plaušu adenokarcinomā.

Audums
Plaušas
Slimība
Minimāli invazīva plaušu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H1650 (Cytion kataloga numurs 305059)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
27 gadi
Etniskā piederība
Eiropas