Siirry sisältöön
NCI-H1650
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Minimaalisesti invasiivinen keuhkojen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Asiakirjat

NCI-H1650

Cell line · Tuotenumero 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H1650-solulinja on peräisin ihmisen ei-pienisoluisesta keuhkosyövästä (NSCLC), erityisesti adenokarsinoomasta, ja sitä käytetään laajalti syöpätutkimuksessa sen erityisen geneettisen profiilin ja lääketestauksen kannalta tärkeän merkityksen vuoksi. Tässä solulinjassa on mutaatioita keskeisissä onkogeenisissä ja kasvainsuppressorireiteissä, mukaan lukien deletio PTEN-geenissä ja aktivoiva mutaatio EGFR:ssä. Nämä geneettiset muutokset tekevät NCI-H1650:stä sopivan mallin kasvainten syntymekanismien ja terapeuttisen resistenssin tutkimiseen NSCLC:ssä, erityisesti EGFR-signalointireittiin kohdistettujen kohdennettujen hoitojen yhteydessä.

PTEN:n deletoituminen NCI-H1650:ssä johtaa fosfataasiaktiivisuuden menetykseen, mikä heikentää PI3K/AKT-signalointireitin toimintaa, mikä edistää kasvaimen etenemistä ja resistenssiä tietyille terapeuttisille aineille. Aktivoiva EGFR-mutaatio, jota esiintyy yleisesti keuhkojen adenokarsinoomassa, tekee solulinjasta erityisen herkän erlotinibin kaltaisille tyrosiinikinaasin estäjille. Näiden geneettisten muutosten samanaikainen esiintyminen edellyttää kuitenkin usein yhdistelmähoitoja, jotta voidaan voittaa adaptiiviset resistenssimekanismit, joihin liittyy kompensoivia signalointireittejä, kuten mTOR tai MET.

Geneettisten ja signalointiominaisuuksiensa lisäksi NCI-H1650 on ollut mukana lukuisissa tutkimuksissa, joissa on tutkittu somaattisia mutaatioita, kopiolukumuutoksia ja epigeneettisiä muutoksia syöpäsolulinjoissa. Sen vaste EGFR- ja PI3K-reittien estäjille korostaa sen hyödyllisyyttä prekliinisessä lääkekehityksessä ja yksilöllistetyn lääketieteen strategioissa. Tämä solulinja toimii edustavana mallina keuhkojen adenokarsinooman onkogeenisten ajureiden ja terapeuttisten haavoittuvuuksien välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Minimaalisesti invasiivinen keuhkojen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H1650 (Cytionin luettelonumero 305059)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
27 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen