Ga naar de inhoud
NCI-H1650
Weefsel
Long
Ziekte
Minimaal invasief longadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Documenten

NCI-H1650

Cell line · Productnummer 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCI-H1650 cellijn is afgeleid van een humaan niet-kleincellig longcarcinoom (NSCLC), specifiek adenocarcinoom, en wordt veel gebruikt in kankeronderzoek vanwege het kenmerkende genetische profiel en de relevantie voor het testen van geneesmiddelen. Deze cellijn bevat mutaties in belangrijke oncogene en tumorsuppressor pathways, waaronder een deletie in het PTEN-gen en een activerende mutatie in EGFR. Deze genetische veranderingen maken NCI-H1650 een geschikt model voor het bestuderen van mechanismen van tumorigenese en therapeutische resistentie in NSCLC, met name in de context van gerichte therapieën gericht op de EGFR-signaleringsroute.

De verwijdering van PTEN in NCI-H1650 resulteert in het verlies van fosfataseactiviteit, waardoor de PI3K/AKT-signaleringsroute wordt gedereguleerd, wat bijdraagt aan tumorgroei en resistentie tegen bepaalde therapeutische middelen. De activerende EGFR-mutatie, die vaak voorkomt in longadenocarcinoom, maakt de cellijn bijzonder gevoelig voor tyrosinekinaseremmers zoals erlotinib. Het samen voorkomen van deze genetische veranderingen maakt echter vaak combinatietherapieën nodig om adaptieve resistentiemechanismen te overwinnen waarbij compensatoire signaalroutes betrokken zijn, zoals mTOR of MET.

Naast de genetische en signaleringskenmerken is NCI-H1650 opgenomen in talloze onderzoeken naar somatische mutaties, variaties in het kopiegetal en epigenetische veranderingen in kankercellijnen. De respons op remmers van de EGFR- en PI3K-routes benadrukt het nut van deze cellijn voor preklinische ontdekking van geneesmiddelen en gepersonaliseerde geneeskundestrategieën. Deze cellijn dient als representatief model voor het onderzoeken van de wisselwerking tussen oncogene drivers en therapeutische kwetsbaarheden in longadenocarcinoom.

Weefsel
Long
Ziekte
Minimaal invasief longadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H1650 (Cytion catalogusnummer 305059)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
27 jaar
Etnische afkomst
Europese