İçeriğe atla
NCI-H1650
Doku
Akciğer
Hastalık
Minimal invaziv akciğer adenokarsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

NCI-H1650

Cell line · Ürün numarası 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H1650 hücre hattı, insan küçük hücreli dışı akciğer karsinomundan (NSCLC), özellikle adenokarsinomdan türetilmiştir ve kendine özgü genetik profili ve ilaç testindeki önemi nedeniyle kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattı, PTEN geninde bir delesyon ve EGFR'de aktive edici bir mutasyon dahil olmak üzere önemli onkojenik ve tümör baskılayıcı yolaklarda mutasyonlara sahiptir. Bu genetik değişiklikler NCI-H1650'yi, özellikle EGFR sinyal yolağına yönelik hedefe yönelik tedaviler bağlamında, KHDAK'de tümör oluşum mekanizmalarını ve terapötik direnci incelemek için uygun bir model haline getirmektedir.

NCI-H1650'de PTEN'in silinmesi, PI3K/AKT sinyal yolunu düzensizleştirerek tümör ilerlemesine ve belirli terapötik ajanlara karşı dirence katkıda bulunan fosfataz aktivitesinin kaybıyla sonuçlanır. Akciğer adenokarsinomunda yaygın olarak görülen aktive edici EGFR mutasyonu, hücre hattını erlotinib gibi tirozin kinaz inhibitörlerine karşı özellikle hassas hale getirmektedir. Bununla birlikte, bu genetik değişikliklerin birlikte ortaya çıkması, mTOR veya MET gibi telafi edici sinyal yollarını içeren adaptif direnç mekanizmalarının üstesinden gelmek için genellikle kombinasyon tedavilerini gerektirir.

Genetik ve sinyal özelliklerine ek olarak NCI-H1650, kanser hücre hatlarındaki somatik mutasyonları, kopya sayısı varyasyonlarını ve epigenetik değişiklikleri inceleyen çok sayıda çalışmaya dahil edilmiştir. EGFR ve PI3K yolaklarının inhibitörlerine verdiği yanıt, klinik öncesi ilaç keşfi ve kişiselleştirilmiş tıp stratejilerindeki faydasını vurgulamaktadır. Bu hücre hattı, akciğer adenokarsinomunda onkojenik sürücüler ve terapötik zayıflıklar arasındaki etkileşimi araştırmak için temsili bir model olarak hizmet eder.

Doku
Akciğer
Hastalık
Minimal invaziv akciğer adenokarsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H1650 (Cytion katalog numarası 305059)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
27 yıl
Etnik köken
Avrupa