Mine otse sisu juurde
NCI-H1650
Kude
Kopsud
Haigus
Minimaalselt invasiivne kopsu adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Dokumendid

NCI-H1650

Cell line · Toote number 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H1650 rakuliin on saadud inimese mitteväikerakk-kopsukartsinoomist (NSCLC), täpsemalt adenokartsinoomist, ja seda kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes tänu selle erilisele geneetilisele profiilile ja asjakohasusele ravimite testimisel. Sellel rakuliinil on mutatsioonid peamistes onkogeensetes ja kasvajasupressoriradades, sealhulgas deletsioon PTEN-geenis ja aktiveeriv mutatsioon EGFR-is. Need geneetilised muutused muudavad NCI-H1650 sobilikuks mudeliks kasvajate tekkimise ja terapeutilise resistentsuse mehhanismide uurimiseks NSCLC-s, eriti EGFR-signaaliteele suunatud sihtotstarbeliste ravimeetodite kontekstis.

PTENi deletsioon NCI-H1650-s põhjustab fosfataasi aktiivsuse kadumist, mis dereguleerib PI3K/AKT signaalirada, aidates kaasa kasvaja progresseerumisele ja resistentsusele teatavate ravimeetodite suhtes. Aktiveeriv EGFR-mutatsioon, mida tavaliselt täheldatakse kopsu adenokartsinoomil, muudab rakuliini eriti tundlikuks türosiinkinaasi inhibiitorite, nagu erlotiniib, suhtes. Nende geneetiliste muutuste samaaegne esinemine nõuab sageli kombineeritud ravi, et ületada adaptiivseid resistentsusmehhanisme, mis hõlmavad kompenseerivaid signaaliradu, nagu mTOR või MET.

Lisaks geneetilistele ja signaalimise omadustele on NCI-H1650 kaasatud arvukatesse uuringutesse, milles uuritakse somaatilisi mutatsioone, koopiaarvu muutusi ja epigeneetilisi muutusi vähirakuliinides. Tema reaktsioon EGFR- ja PI3K-radade inhibiitoritele rõhutab tema kasulikkust prekliinilises ravimiuuringus ja personaliseeritud meditsiini strateegiates. See rakuliin on representatiivne mudel onkogeensete ajendite ja terapeutiliste haavatavuste vastastikuse mõju uurimiseks kopsu adenokartsinoomis.

Kude
Kopsud
Haigus
Minimaalselt invasiivne kopsu adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
NCI-H1650 (Cytioni katalooginumber 305059)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
27 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa