Ir diretamente para o conteúdo
NCI-H1650
Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma pulmonar minimamente invasivo
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
NCI-H1650, H-1650, H1650_CO, NCIH1650

Documentos

NCI-H1650

Cell line · Número do produto 305059

The NCI-H1650 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma, and is widely used in cancer research ...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular NCI-H1650 é derivada de um carcinoma do pulmão humano de células não pequenas (NSCLC), especificamente um adenocarcinoma, e é amplamente utilizada na investigação do cancro devido ao seu perfil genético distinto e à sua relevância para o ensaio de medicamentos. Esta linha celular apresenta mutações nas principais vias oncogénicas e supressoras de tumores, incluindo uma deleção no gene PTEN e uma mutação activadora no EGFR. Estas alterações genéticas fazem da NCI-H1650 um modelo adequado para o estudo dos mecanismos de tumorigénese e de resistência terapêutica no CPNPC, especialmente no contexto de terapias direcionadas para a via de sinalização do EGFR.

A deleção do PTEN no NCI-H1650 resulta na perda da atividade fosfatásica, que desregula a via de sinalização PI3K/AKT, contribuindo para a progressão tumoral e resistência a determinados agentes terapêuticos. A mutação activadora do EGFR, frequentemente observada no adenocarcinoma do pulmão, torna a linha celular particularmente sensível aos inibidores da tirosina quinase, como o erlotinib. No entanto, a coocorrência destas alterações genéticas exige frequentemente terapias combinadas para ultrapassar os mecanismos de resistência adaptativa que envolvem vias de sinalização compensatórias, como o mTOR ou o MET.

Para além das suas caraterísticas genéticas e de sinalização, o NCI-H1650 foi incluído em numerosos estudos que examinaram mutações somáticas, variações do número de cópias e alterações epigenéticas em linhas celulares cancerígenas. A sua resposta aos inibidores das vias EGFR e PI3K realça a sua utilidade na descoberta de medicamentos pré-clínicos e nas estratégias de medicina personalizada. Esta linha celular serve de modelo representativo para investigar a interação entre factores oncogénicos e vulnerabilidades terapêuticas no adenocarcinoma do pulmão.

Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma pulmonar minimamente invasivo
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • NCI-H1650
  • H-1650
  • H1650_CO
  • NCIH1650

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
NCI-H1650 (número de catálogo Cytion 305059)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1483

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
27 anos
Etnia
Europeu