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Farage
Gewebe
Lymphatisches System
Krankheit
Diffuses großzelliges B-Zell-Lymphom vom Typ Keimzentrum-B-Zelle
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
FARAGE, Farage OL, Farage Original Line

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Farage

Cell line · Artikelnummer 305071

The Farage cell line originates from a B lymphocyte derived from an adult female diagnosed with non-Hodgkin's B-cell lymphoma. This cell line is particula...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Farage-Zelllinie stammt von einem B-Lymphozyten, der von einer erwachsenen Frau stammt, bei der ein Non-Hodgkin-B-Zell-Lymphom diagnostiziert wurde. Diese Zelllinie ist aufgrund ihrer einzigartigen Eigenschaften und Reaktionen auf verschiedene Stimuli besonders wertvoll für immunologische Studien. Farage-Zellen wachsen in Suspension und zeichnen sich dadurch aus, dass sie weder Oberflächen- noch zytoplasmatische Immunglobuline exprimieren, was ihre Nützlichkeit für Studien unterstreicht, die sich auf die Immunantwort ohne die Interferenz dieser Proteine konzentrieren.

Bei Behandlung mit Interleukin-4 (IL-4) zeigen Farage-Zellen einen Anstieg der Expression verschiedener Marker, darunter CD23, CD54 und CD58, während die Werte für CD21, CD22 und CD38 sinken. Diese Modulation der Oberflächenmarker deutet auf die Rolle von IL-4 bei der Beeinflussung des Verhaltens von B-Zellen hin und stellt ein nützliches Modell für die Erforschung der Signalwege und Regulationsmechanismen in B-Zellen dar. Darüber hinaus unterstützt die Reaktion auf die Behandlung mit Phorbol 12-Myristat 13-Acetat (PMA), die zu einer Herabregulierung von CD21 und CD23 führt, die Anwendung von IL-4 bei der Untersuchung der kinasegesteuerten Signalübertragung in B-Zellen.

Das Fehlen von terminaler Desoxynukleotidyltransferase (TdT) und rekombinationsaktivierenden Genen (RAG-1 und RAG-2) in Farage-Zellen bestätigt ihre Klassifizierung als reife B-Zellen und nicht als Prä-B-Zellen. Dieser Aspekt ist für die Erforschung der reifen Stadien der B-Zellentwicklung oder -funktion von entscheidender Bedeutung. Darüber hinaus kann das Vorhandensein des Epstein-Barr-Virus (EBV) in diesen Zellen für Studien genutzt werden, die virale Interaktionen mit zellulären Mechanismen des Wirts untersuchen, insbesondere im Zusammenhang mit onkogenen Prozessen in Lymphozyten.

Gewebe
Lymphatisches System
Krankheit
Diffuses großzelliges B-Zell-Lymphom vom Typ Keimzentrum-B-Zelle
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
  • FARAGE
  • Farage OL
  • Farage Original Line

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Lymphoblasten
Verdopplungszeit
48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
Farage (Cytion-Katalognummer 305071)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_3302

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % hitzeinaktiviertem FBS, fügen Sie 2,5 g/L Glukose und 10 mM HEPES
Subkultivierung
Kann auf 1,5–2 × 10⁶ Zellen/ml kultiviert werden. Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 5 × 10⁵ Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Aussaatdichte
5 x 105 Zellen/ml
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
70 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch