Přejít na obsah
Farage
Tkáň
Lymfatický systém
Nemoc
Difúzní velkobuněčný B-lymfom typu B-lymfocytů germinálního centra
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
FARAGE, Farage OL, Farage Original Line

Dokumenty

Farage

Cell line · Číslo výrobku 305071

The Farage cell line originates from a B lymphocyte derived from an adult female diagnosed with non-Hodgkin's B-cell lymphoma. This cell line is particula...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Farage pochází z lymfocytů B odvozených od dospělé ženy s diagnózou nehodgkinského lymfomu B. Tato buněčná linie je zvláště cenná v imunologických studiích díky svým jedinečným vlastnostem a reakcím na různé podněty. Farageovy buňky rostou v suspenzi a vyznačují se tím, že neexprimují povrchové ani cytoplazmatické imunoglobuliny, což zdůrazňuje jejich užitečnost ve studiích zaměřených na imunitní odpověď bez interference těchto proteinů.

Při působení interleukinu-4 (IL-4) vykazují buňky Farage zvýšení exprese několika markerů včetně CD23, CD54 a CD58, zatímco hladiny CD21, CD22 a CD38 se snižují. Tato modulace povrchových markerů naznačuje roli IL-4 při ovlivňování chování B-buněk a poskytuje užitečný model pro zkoumání signálních drah a regulačních mechanismů v B-buňkách. Reakce na působení fosforbol 12-myristátu 13-acetátu (PMA), která vede ke snížení regulace CD21 a CD23, navíc podporuje jeho použití při studiu signalizace řízené kinázami v B-buňkách.

Nepřítomnost terminální deoxynukleotidyltransferázy (TdT) a genů aktivujících rekombinaci (RAG-1 a RAG-2) ve Faragových buňkách potvrzuje jejich klasifikaci jako zralých B-buněk, nikoli pre-B-buněk. Tento aspekt je zásadní pro výzkum zaměřený na zralá stadia vývoje nebo funkce B-buněk. Přítomnost viru Epsteina-Barrové (EBV) v těchto buňkách lze navíc využít ve studiích zkoumajících interakce viru s hostitelskými buněčnými mechanismy, zejména v souvislosti s onkogenními procesy v lymfocytech.

Tkáň
Lymfatický systém
Nemoc
Difúzní velkobuněčný B-lymfom typu B-lymfocytů germinálního centra
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
  • FARAGE
  • Farage OL
  • Farage Original Line

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblasty
Doba zdvojnásobení
48 hodin

04Identifikátory

Citace
Farage (katalogové číslo Cytion 305071)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3302

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS, přidejte 2,5 g/l glukózy a 10 mM HEPES
Subkultivace
Lze kultivovat na 1,5–2 x 106 buněk/ml. Jemně homogenizujte buněčnou suspenzi v baňce pipetováním nahoru a dolů, poté odeberte reprezentativní vzorek k určení buněčné hustoty na ml. Suspenzi zřeďte čerstvým kultivačním médiem, aby se dosáhlo koncentrace buněk 5 x 105 buněk/ml, a upravenou suspenzi rozdělte do nových baňek pro další kultivaci.
Hustota výsevu
5 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
70 let
Etnická příslušnost
Evropská