Mine otse sisu juurde
Farage
Kude
Lümfisüsteem
Haigus
Hajus suur B-rakkude lümfoomi idukeskuse B-rakkude tüüp
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
FARAGE, Farage OL, Farage Original Line

Dokumendid

Farage

Cell line · Toote number 305071

The Farage cell line originates from a B lymphocyte derived from an adult female diagnosed with non-Hodgkin's B-cell lymphoma. This cell line is particula...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Farage'i rakuliin pärineb B-lümfotsüütidest, mis on saadud täiskasvanud naiselt, kellel on diagnoositud mitte-Hodgkini B-rakkude lümfoom. See rakuliin on eriti väärtuslik immunoloogilistes uuringutes tänu oma ainulaadsetele omadustele ja reaktsioonidele erinevatele stiimulitele. Farage'i rakud kasvavad suspensioonis ja on märkimisväärsed selle poolest, et nad ei ekspresseeri pinna- või tsütoplasmaimmuunglobuliine, mis rõhutab nende kasulikkust immuunvastusele keskendunud uuringutes ilma nende valkude sekkumiseta.

Kui Farage'i rakke töödeldakse interleukiin-4 (IL-4), suureneb mitme markeri, sealhulgas CD23, CD54 ja CD58 ekspressioon, samal ajal kui CD21, CD22 ja CD38 tase väheneb. Selline pinnamarkerite moduleerimine viitab IL-4 rollile B-rakkude käitumise mõjutamisel ja annab kasuliku mudeli B-rakkude signaaliradade ja regulatiivsete mehhanismide uurimiseks. Lisaks sellele toetab vastus forbool-12-müristaat-13-atsetaat (PMA) ravile, mille tulemuseks on CD21 ja CD23 alareguleerimine, veelgi selle kasutamist B-rakkude kinaasipõhise signalisatsiooni uurimisel.

Terminaalse deoksünukleotidüültransferaasi (TdT) ja rekombinatsiooni aktiveerivate geenide (RAG-1 ja RAG-2) puudumine Farage'i rakkudes kinnitab nende liigitamist pigem küpseteks B-rakkudeks kui pre-B-rakkudeks. See aspekt on oluline B-rakkude arengu või toimimise küpset faasi käsitlevate uuringute jaoks. Lisaks saab Epstein-Barri viiruse (EBV) olemasolu nendes rakkudes kasutada ära uuringutes, milles uuritakse viiruse ja peremeesraku mehhanismide vastastikmõju, eriti lümfotsüütide onkogeensete protsesside kontekstis.

Kude
Lümfisüsteem
Haigus
Hajus suur B-rakkude lümfoomi idukeskuse B-rakkude tüüp
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • FARAGE
  • Farage OL
  • Farage Original Line

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid
Kahekordistumisaeg
48 tundi

04Tunnused

Viide
Farage (Cytioni katalooginumber 305071)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3302

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga, lisada 2,5 g/l glükoosi ja 10 mM HEPES
Kultuuri edasikasvatamine
Võib kasvatada kuni 1,5–2 x 106 rakku/ml. Homogeniseerige rakususpensioon kolvis õrnalt pipettides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kasvatuskeskkonda, et saavutada rakkude kontsentratsioon 5 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Külvitihedus
5 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
70 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa