Siirry sisältöön
Farage
Kudos
Imusuonisto
Sairaus
Diffuusi suurisoluinen B-solulymfooma itukeskuksen B-solutyyppi
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
FARAGE, Farage OL, Farage Original Line

Asiakirjat

Farage

Cell line · Tuotenumero 305071

The Farage cell line originates from a B lymphocyte derived from an adult female diagnosed with non-Hodgkin's B-cell lymphoma. This cell line is particula...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Farage-solulinja on peräisin B-lymfosyytistä, joka on peräisin aikuiselta naiselta, jolla on diagnosoitu non-Hodgkinin B-solulymfooma. Tämä solulinja on erityisen arvokas immunologisissa tutkimuksissa sen ainutlaatuisten ominaisuuksien ja eri ärsykkeisiin reagoimisen vuoksi. Farage-solut kasvavat suspensiossa, eivätkä ne ilmentäisi pinta- tai sytoplasmisia immunoglobuliineja, mikä korostaa niiden käyttökelpoisuutta tutkimuksissa, joissa keskitytään immuunivasteeseen ilman näiden proteiinien häiritsevyyttä.

Kun Farage-soluja käsitellään interleukiini-4:llä (IL-4), useiden merkkiaineiden, kuten CD23:n, CD54:n ja CD58:n, ilmentyminen lisääntyy, kun taas CD21-, CD22- ja CD38-tasot vähenevät. Tämä pintamarkkereiden modulaatio viittaa IL-4:n rooliin B-solujen käyttäytymiseen vaikuttamisessa ja tarjoaa hyödyllisen mallin B-solujen signaalireittien ja säätelymekanismien tutkimiseen. Lisäksi vaste forboli 12-myristaatti 13-asetaatti (PMA) -käsittelylle, joka johtaa CD21:n ja CD23:n alaregulaatioon, tukee entisestään IL:n käyttöä B-solujen kinaasivetoisen signaloinnin tutkimisessa.

Terminaalisen deoksinukleotidyylitransferaasin (TdT) ja rekombinaatiota aktivoivien geenien (RAG-1 ja RAG-2) puuttuminen Farage-soluista vahvistaa niiden luokittelua kypsiksi B-soluiksi eikä esi-B-soluiksi. Tämä näkökohta on ratkaisevan tärkeä B-solujen kehityksen tai toiminnan kypsiin vaiheisiin kohdistuvan tutkimuksen kannalta. Lisäksi Epstein-Barr-viruksen (EBV) esiintymistä näissä soluissa voidaan hyödyntää tutkimuksissa, joissa tutkitaan viruksen vuorovaikutusta isäntäsolujen mekanismien kanssa, erityisesti lymfosyyttien onkogeenisten prosessien yhteydessä.

Kudos
Imusuonisto
Sairaus
Diffuusi suurisoluinen B-solulymfooma itukeskuksen B-solutyyppi
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
  • FARAGE
  • Farage OL
  • Farage Original Line

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit
Kaksinkertaistumisaika
48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Farage (Cytion-tuotenumero 305071)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_3302

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään väliaine 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä, lisätään 2,5 g/l glukoosia ja 10 mM HEPES
Soluviljely
Voidaan viljellä 1,5–2 x 106 solua/ml. Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 5 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Kylvötiheys
5 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
70 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen