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Farage
Tessuto
Sistema linfatico
Malattia
Linfoma diffuso a grandi cellule B di tipo centro germinativo
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
FARAGE, Farage OL, Farage Original Line

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Farage

Cell line · Codice prodotto 305071

The Farage cell line originates from a B lymphocyte derived from an adult female diagnosed with non-Hodgkin's B-cell lymphoma. This cell line is particula...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Farage proviene da un linfocita B derivato da una donna adulta a cui è stato diagnosticato un linfoma non Hodgkin a cellule B. Questa linea cellulare è particolarmente preziosa negli studi immunologici grazie alle sue caratteristiche uniche e alle sue reazioni a vari stimoli. Le cellule Farage crescono in sospensione e si distinguono per non esprimere immunoglobuline di superficie o citoplasmatiche, evidenziando la loro utilità negli studi incentrati sulla risposta immunitaria senza l'interferenza di queste proteine.

Quando vengono trattate con interleuchina-4 (IL-4), le cellule di Farage mostrano un aumento dell'espressione di diversi marcatori, tra cui CD23, CD54 e CD58, mentre mostrano una riduzione dei livelli di CD21, CD22 e CD38. Questa modulazione dei marcatori di superficie suggerisce il ruolo dell'IL-4 nell'influenzare il comportamento delle cellule B e fornisce un modello utile per esplorare le vie di segnalazione e i meccanismi di regolazione nelle cellule B. Inoltre, la risposta al trattamento con phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), che determina la down-regulation di CD21 e CD23, supporta ulteriormente la sua applicazione per lo studio della segnalazione guidata da chinasi nelle cellule B.

L'assenza di deossinucleotidil transferasi terminale (TdT) e di geni attivatori della ricombinazione (RAG-1 e RAG-2) nelle cellule di Farage conferma la loro classificazione come cellule B mature piuttosto che pre-B. Questo aspetto è cruciale per la ricerca che ha come obiettivo gli stadi maturi dello sviluppo o della funzione delle cellule B. Inoltre, la presenza del virus di Epstein-Barr (EBV) in queste cellule può essere sfruttata negli studi che indagano le interazioni virali con i meccanismi cellulari dell'ospite, in particolare nel contesto dei processi oncogeni nei linfociti.

Tessuto
Sistema linfatico
Malattia
Linfoma diffuso a grandi cellule B di tipo centro germinativo
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
  • FARAGE
  • Farage OL
  • Farage Original Line

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto
Tempo di raddoppio
48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Farage (numero di catalogo Cytion 305071)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3302

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente, aggiungere 2,5 g/L di glucosio e 10 mM di HEPES
Subcoltura
Può essere coltivato fino a 1,5-2 x 106 cellule/ml. Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 5 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Densità di semina
5 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
70 anni
Etnia
Europeo