Media ja reagenssit

40 tuotteet

Lajittele

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Cytion Mammary epithelial growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850185

Rintarauhasen epiteelisolujen kasvualusta

Mammary Epithelial Cell Growth Medium on seerumiton elatusaine ihmisen rintarauhasen epiteelisolujen viljelyyn. Tarjoamme elatusainetta 500 ml:n perusliuoksena, joko yksinään tai yhdessä lisäaineiden kanssa, joko yksittäisinä komponentteina tai valmiiksi sekoitettuna Supplement-Mix-seoksena. Yksittäisten komponenttien avulla yksittäisiä tekijöitä voidaan säätää tai jättää pois, kun taas lisäaineseos lisätään yhdellä kertaa. Lisäaineet ovat välttämättömiä käytön kannalta, ja yksittäiset lisäainekomponentit ovat saatavilla myös erikseen.

€280.00

ilman veroja ja toimituskuluja

McCoys 5A medium (modifioitu), pitoisuus: 3,0 g/l glukoosia, pitoisuus: stabiili glutamiini, pitoisuus: 2,0 mM natriumpyruvaattia, pitoisuus: 2,2 g/l NaHCO₃

McCoy's 5A Medium on erittäin suositeltava ja erikoistunut elatusaine, joka on suunniteltu helpottamaan virusten kasvua ja replikaatiota primaarisissa soluviljelmissä. Se on saanut merkittävää tunnustusta poikkeuksellisen suorituskykynsä ansiosta erilaisissa biologisissa tutkimussovelluksissa. Yksi McCoy's 5A -kasvatusaineen merkittävistä käyttökohteista on sen hyödyntäminen ihmisen paksusuolisyöpäsolulinjojen viljelyssä. Erityisesti sitä on käytetty leusiinirikkaita toistojaksoja sisältävän G-proteiiniin kytkeytyvän reseptorin (LGR5) tutkimuksessa sekä sen roolin selvittämisessä paksusuolisyövän etäpesäkkeiden muodostumisessa. Tätä elatusainetta on käytetty tehokkaasti useiden paksusuolisyöpäsolulinjojen viljelyssä, mukaan lukien HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ja TENN, mikä on antanut tutkijoille mahdollisuuden syventää ymmärrystään paksusuolisyövän etäpesäkkeiden taustalla olevista mekanismeista. Syöpätutkimuksen lisäksi McCoy's 5A -kasvatusliuos on osoittautunut välttämättömäksi osteoblastien tutkimuksessa. Tutkijat, jotka tutkivat kalsiumia vailla olevan hydroksiapatiitin ionireaktiivisuutta tavanomaisissa soluviljelyalustoissa, ovat käyttäneet tätä alustoa osteoblastien viljelyyn. Tämä sovellus on auttanut ymmärtämään paremmin osteoblastien ja kalsiumia vailla olevan hydroksiapatiitin välisiä vuorovaikutuksia, mikä on edistänyt luututkimuksen alalla saavutettua kehitystä. McCoyn 5A-kasvatusliuos on muotoiltu huolellisesti muokkaamalla Basal Medium Eaglen sisältämiä aminohappoja, jotta se tukisi maksakasvainsoluja optimaalisesti. Tämän rikastetun koostumuksen ansiosta se sopii monenlaisiin vakiintuneisiin solulinjoihin sekä primaarisoluihin, mikä parantaa entisestään sen monipuolisuutta ja sovellettavuutta erilaisissa tutkimusympäristöissä. McCoy's 5A -kasvatusliuoksen biokemialliset ja fysiologiset vaikutukset ulottuvat maksan kasvainsolujen ulkopuolelle. Sitä on käytetty menestyksekkäästi tukemaan luuytimen, ihon, ikenien, munuaisten, omentumin, lisämunuaisten, keuhkojen, pernan, rotan alkion ja muiden solutyyppien primaariviljelmien kasvua. Tämä laaja käyttöalue todistaa McCoyn 5A-kasvatusliuoksen monipuolisen hyödyllisyyden erilaisten solutyyppien kasvun ja ylläpidon tukemisessa kattavaa biologista tutkimusta varten. Koostumus Tämä McCoy's 5A -kasvatusliuos (modifioitu) sisältää 3,0 g/l glukoosia, stabiilia glutamiinia, 2,0 mM natriumpyruvaattia ja 2,2 g/l NaHCO3:ta. Laadunvalvonta • pH = 7,2 ± 0,02 lämpötilassa 20–25 °C. • Jokaisen erän steriiliys sekä mykoplasman ja bakteerien puuttuminen on testattu. Säilytys • Säilytä jääkaapissa +2–+8 °C:ssa pimeässä. Jäädyttäminen ja lämmittäminen yli +37 °C:seen heikentävät tuotteen laatua. • Älä kuumenna elatusainetta yli 37 °C:een tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä (esim. mikroaaltouuneja). • Jos vain osa elatusaineesta käytetään, ota tarvittava määrä pullosta ja lämmitä se huoneenlämpötilaan. • Kaikkien elatusaineiden, peruselatusainetta lukuun ottamatta, säilyvyysaika on 6–8 viikkoa avaamispäivästä lukien. Koostumus Ainesosat mg/l Epäorgaaniset suolatKalsiumkloridi x 2H₂O132,00 Magnesiumsulfaatti97,67 Kaliumkloridi400,00 Natriumkloridi6 460,00 Dinatriumvetyfosfaatti (vedetön)504,00 Muut aineosatD(+)-glukoosi (vedetön)3 000,00 Glutationi (pelkistetty)0,50 Lihapeptoni600,00 Fenolipunaisen natriumsuola11,00 AminohapotL-alaniini13,36 L-arginiini x HCl42,14 L-asparagiini x H₂O45,03 L-asparagiinihappo19,97 L-kysteiini x HCl x H₂O31,75 L-glutamiini (stabiili)219,15 L-glutamiinihappo22,07 Glysiini7,51 L-histidiini x HCl x H₂O20,96 L-hydroksiproliini19,67 L-isoleusiini39,36 L-leusiini39,36 L-lysiini x HCl36,54 L-metioniini14,92 L-fenyylialaniini16,52 L-proliini17,27 L-seriini26,28 L-treoniini17,87 L-tryptofaani3,06 L-tyrosiinin dinatriumsuola26,10 L-valiini17,57 Vitamiinitp-aminobentsoehappo1,00 Askorbiinihappo0,56 D(+)-biotiini0,20 D-kalsiumpantotenaatti0,20 Koliinikloridi5,00 Foolihappo10,00 myo-inositoli36,00 Nikotiiniamidi0,50 Nikotiinihappo0,50 Pyridoksaali-HCl0,50 Pyridoksiini-HCl0,50 Riboflaviini0,20 Tiamiini-HCl0,20 B12-vitamiini2,00

€30.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Väliaine 199, pitoisuus: 2,7 mM stabiilia glutamiinia, pitoisuus: 2,2 g/l NaHCO₃, pitoisuus: EBSS

Medium 199 on monipuolinen ja laajalti käytetty soluviljelyalusta, joka on kehitetty erityisesti primaaristen eksplanttien viljelyyn. Tämä kattava alusta yhdistää välttämättömiä vitamiineja, aminohappoja ja muita tekijöitä tarjotakseen täysin määritellyn ravintolähteen monenlaisille solutyypeille. Se sopii erityisen hyvin muuntamattomille soluille, mikä tekee siitä korvaamattoman työkalun biologisessa tutkimuksessa. Medium 199:llä on laaja valikoima sovelluksia alalla. Sillä voidaan tehokkaasti ylläpitää cumulus-oosyyttikompleksia (COC) ja tukea oosyyttien in vitro -kypsymistä. Lisäksi sitä käytetään imulinjojen huuhteluun saksalaisilta Holstein-lehmiltä tapahtuvan munasolujen keräämisen yhteydessä. Medium 199 toimii myös erinomaisena viljelyalustana rotista peräisin olevien sydämen endoteelisolujen viljelyssä. Nämä käyttökohteet osoittavat Medium 199:n monipuolisuuden ja mukautuvuuden erilaisiin kokeellisiin tarpeisiin. Historia Medium 199:n kehittäminen 1950-luvulla merkitsi merkittävää edistysaskelta kudosviljelyalustojen alalla. Ennen sen käyttöönottoa monet viljelyalustat perustuivat eläinperäisiin tuotteisiin ja kudosuutteisiin. Morgan ja hänen kollegansa mullistivat kuitenkin alan kehittämällä täysin määritellyn ravintolähteen soluviljelyille. Kokeissaan, joissa he käyttivät erilaisia vitamiinien, aminohappojen ja muiden tekijöiden yhdistelmiä, he havaitsivat Medium 199:n poikkeukselliset kasvua edistävät ominaisuudet. Laadunvalvonta • pH = 7,2 ± 0,02 lämpötilassa 20–25 °C. • Jokaisen erän steriiliys sekä mykoplasman ja bakteerien puuttuminen on testattu. Säilytys • Säilytä jääkaapissa +2–+8 °C:ssa pimeässä. Jäädyttäminen ja lämmittäminen yli +37 °C:seen heikentävät tuotteen laatua. • Älä kuumenna elatusainetta yli 37 °C:een tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä (esim. mikroaaltouuneja). • Jos vain osa elatusaineesta käytetään, ota tarvittava määrä pullosta ja lämmitä se huoneenlämpötilaan. • Kaikkien elatusaineiden, peruselatusainetta lukuun ottamatta, säilyvyysaika on 8 viikkoa valmistuspäivästä lukien. Koostumus Ainesosat mg/l Epäorgaaniset suolat Kalsiumkloridi x 2H₂O 264,92 Rauta(III)nitraatti x 9H₂O 0,72 Magnesiumsulfaatti 97,67 Kaliumkloridi 400,00 Natriumasetaatti x 3H₂O 82,95 Natriumkloridi 6 800,00 Natriumdihydrogeenifosfaatti x H₂O 140,00 Muut komponentit Adeniinisulfaatti 10,00 AMP 0,20 ATP 1,00 Kolesteroli 0,20 2'-deoksiriboosi 0,50 D(+)-glukoosi, vedetön 1 000,00 Glutationi (red.) 0,05 Guaaniini x HCl 0,30 Hypoksaantiini 0,30 Fenolipunainen 10,00 D-riboosi 0,50 Tymiini 0,30 Tween 80 4,90 Urasiliini 0,30 Ksantiini 0,30 NaHCO₃ 2 200,00 Aminohapot L-alaniini 25,00 L-arginiini x HCl 70,00 L-asparagiinihappo 30,00 L-kysteiini x HCl x H₂O 0,10 L-kystiini 20,00 L-glutamiini, stabiili 149,00 L-glutamiinihappo 67,00 Glysiini 50,00 L-histidiini x HCl x H₂O 21,88 L-hydroksiproliini 10,00 L-isoleusiini 20,00 L-leusiini 60,00 L-lysiini x HCl 70,00 L-metioniini 15,00 L-fenyylialaniini 25,00 L-proliini 40,00 L-seriini 25,00 L-treoniini 30,00 L-tryptofaani 10,00 L-tyrosiini 40,00 L-valiini 25,00 Vitamiinit 4-aminobentsoehappo 0,05 Askorbiinihappo 0,05 D(+)-biotiini 0,01 Kalsiferoli 0,10 D-kalsiumpantotenaatti 0,01 Koliinikloridi 0,50 Foolihappo 0,01 myo-inositoli 0,05 Menadioni 0,01 Nikotiinihappo 0,025 Nikotiiniamidi 0,025 Pyridoksaali x HCl 0,025 Pyridoksoli x HCl 0,025 Riboflaviini 0,01 DL-α-tokoferolifosfaatin dinatriumsuola 0,01 Tiamiini x HCl 0,01 A-vitamiiniasetaatti 0,14

€40.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Cytion Melanocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850155

Melanosyyttien kasvualusta

Melanocyte Growth Medium on seerumiton elatusaine ihmisen epidermaalisten melanosyyttien viljelyyn. Täydellinen elatusaine sisältää L-glutamiinia, naudan aivolisäkeuutetta (BPE), ihmisen rekombinanttia bFGF:ää, hydrokortisonia, ihmisen rekombinanttia insuliinia ja PMA:ta. Tarjoamme elatusainetta 500 ml:n perusliuoksena, joko yksinään tai yhdessä lisäaineiden kanssa, joko yksittäisinä komponentteina tai valmiiksi sekoitettuna Supplement-Mix-seoksena. Yksittäisten komponenttien avulla yksittäisiä tekijöitä voidaan säätää tai jättää pois, kun taas Supplement-Mix lisätään yhdellä kertaa. Lisäaineet ovat välttämättömiä käytön kannalta, ja molemmat lisäainemuodot ovat saatavilla myös erikseen.

€270.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850013

Mikrovaskulaaristen endoteelisolujen kasvualusta

Mikrovaskulaaristen endoteelisolujen kasvualustaa käytetään ihmisen mikrovaskulaaristen endoteelisolujen viljelyyn, esimerkiksi dermiksesta, keuhkoista tai sydämestä peräisin olevien solujen viljelyyn. Valmis kasvualusta sisältää sikiön vasikan seerumia, L-glutamiinia, ECGS/H:ta (endoteelisolujen kasvun lisäainetta, jossa on hepariinia), EGF:ää ja hydrokortisonia. Määriteltyjä rekombinanttisia kasvutekijöitä, kuten VEGF:ää, varten valitse Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium. Tarjoamme elatusainetta 500 ml:n perusliuoksena, joko yksinään tai yhdessä lisäaineiden kanssa, joko yksittäisinä komponentteina tai valmiiksi sekoitettuna Supplement-Mix-seoksena. Yksittäisten komponenttien avulla yksittäisiä tekijöitä voidaan säätää tai jättää pois, kun taas lisäaineseos lisätään yhdellä kertaa. Peruskasvatusliuosta on saatavana myös fenolipunavapaana samoissa pakkauskooissa, mikä estää häiriöt fluoresenssi- ja kolorimetrisissä mittauksissa sekä fenolipunavärin heikon estrogeenin kaltaisen vaikutuksen. Käytössä tarvitaan lisäaineita, ja molemmat lisäainemuodot ovat saatavilla myös erikseen. Lisäaineiden lisäämisen jälkeen valmis elatusaine sisältää 5 % FCS:ää (25 ml / 500 ml perusliuosta).

€180.00

ilman veroja ja toimituskuluja

NCI-H295R-solujen kasvualusta

Tutustu edistykselliseen NCI-H295R-solujen kasvualustaan, joka on ammattitaitoisesti kehitetty ravinneliuos ja suunniteltu erityisesti edistämään nisäkässolulinjojen, mukaan lukien erikoistuneet NCI-H295R-solut, kasvua ja ylläpitoa. Tämä elatusaine erottuu edukseen ainutlaatuisella Dulbeccon modifioidun Eagle-elatusaineen (DMEM) ja Ham's F-12:n (ravintoseos F-12) sekoituksella tarkassa 1:1-suhteessa, jota on rikastettu välttämättömillä lisäaineilla soluviljelyn monimutkaisten tarpeiden täyttämiseksi. Parannettu koostumus takaa erinomaisen soluviljelytuloksen • Täydennetty peruskoostumus: Peruskasvatusliuos on jo itsessään ravinteikas, sillä se yhdistää DMEM:n korkeat aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet Ham’s F-12:n monipuolisiin ravintoaineisiin. Tähän tehokkaaseen seokseen olemme lisänneet 5 % naudan sikiöseerumia (FBS), joka tarjoaa tärkeitä kasvutekijöitä, hormoneja ja proteiineja. • Räätälöidyt lisäaineet: FBS:n lisäksi tätä elatusainetta on vahvistettu tärkeillä lisäaineilla, kuten insuliinilla, transferriinillä, naudan seerumialbumiinilla, seleenihapolla ja linoleenihapolla. Nämä lisäykset vastaavat solujen erityistarpeisiin edistämällä solujen kasvua, aineenvaihduntaa ja yleistä terveyttä. • L-glutamiinilisä: L-glutamiinin läsnäolo tehostaa elatusaineen tehokkuutta entisestään tukemalla välttämättömiä aineenvaihduntaprosesseja ja edistämällä voimakasta solujen lisääntymistä. Optimoitu soluviljelyyn • pH-säädelty ympäristö: Bikarbonaattipuskurijärjestelmän ja fenolipunaisen indikaattorin ansiosta elatusaine takaa vakaan pH-ympäristön. Se on optimoitu 5 %:n CO₂-ilmakehälle, mikä mahdollistaa tarkan pH:n seurannan ja säätämisen. • Laatu ja puhtaus: Jokainen peruskasvatusaineen erä käy läpi tiukat steriiliys-, mykoplasma- ja bakteeritestit, mikä takaa kasvatusaineen luotettavuuden. pH-arvoa säädellyssä kasvatusaineessa voit luottaa sen tasalaatuiseen laatuun ja suorituskykyyn. Käsittely ja säilytys Säilytä elatusaineen laatu säilyttämällä sitä jääkaapissa +2 °C – +8 °C:n lämpötilassa, valolta suojattuna. Vältä äärimmäisiä olosuhteita, kuten jäätymistä tai ylikuumenemista, jotta elatusaineen teho säilyy. Jos käytät vain osan elatusaineesta, lämmitä tarvittava määrä varovasti huoneenlämpötilaan varmistaen, että elatusaine saavuttaa sopivan tilan sen ainesosia vaarantamatta. Säilyvyysaika NCI-H295R-soluviljelyalustan säilyvyysaika on 8 viikkoa valmistuspäivästä lukien, joten se on luotettava valinta soluviljelytarpeisiisi ja varmistaa tutkimuksesi elinvoimaisuuden ja tuottavuuden.

€150.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Non-essential Amino Acids (100x)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered MEM Non-Essential Amino Acids (100x) is a sterile supplement designed to enhance cell growth and viability in mammalian cell culture systems. The formulation corresponds to a 100x concentrate of the non-essential amino acids found in standard Minimum Essential Medium (MEM), allowing for direct supplementation of basal media with minimal preparation. Application and Benefits This supplement provides an additional amino acid pool for rapidly proliferating cells or for cell lines that have lost the capacity to synthesize non-essential amino acids de novo. By alleviating the metabolic burden of biosynthesis, it supports improved growth kinetics, prolonged viability, and greater experimental consistency—especially in nutrient-sensitive or high-density cultures. Composition and Use The solution includes glycine, L-alanine, L-asparagine, L-aspartic acid, L-glutamic acid, L-proline, and L-serine. It is compatible with MEM and most other standard media. To use, dilute 1:100 into the final culture medium. This product is sterile-filtered and ready to use without additional handling steps. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€30.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Cytion Osteoblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850057

Osteoblastien kasvualusta

Osteoblastien kasvualustaa käytetään ihmisen osteoblastien lisääntymiseen. Perusliuoksessa ei ole kalsiumia eikä magnesiumia, jotta mineraalien kertyminen viljelyn aikana pysyy vähäisenä. Mineralisaation käynnistämiseksi siirry käyttämään osteoblastien erilaistumisalustaa. Tarjoamme elatusainetta 500 ml:n perusliuoksena, joko yksinään tai yhdessä lisäaineiden kanssa, joko yksittäisinä komponentteina tai valmiiksi sekoitettuna lisäaineseoksena (Supplement-Mix). Yksittäisten komponenttien avulla yksittäisiä tekijöitä voidaan säätää tai jättää pois, kun taas lisäaineseos lisätään yhdellä kertaa. Käytössä tarvitaan lisäaineita, ja molemmat lisäainemuodot ovat saatavilla myös erikseen. Lisäaineiden lisäämisen jälkeen valmis elatusaine sisältää 10 % FCS:ää (50 ml / 500 ml perusliuosta).

€300.00

ilman veroja ja toimituskuluja

PBS

Fosfaattipuskuroitu suolaliuos (PBS) on laajalti käytetty puskuriliuos biologisessa ja kemiallisessa tutkimuksessa. Sillä on keskeinen rooli pH-tasapainon ja osmolaarisuuden ylläpitämisessä erilaisissa kokeellisissa menettelyissä, kuten kudosten käsittelyssä ja soluviljelyssä. PBS-liuoksemme on huolellisesti valmistettu erittäin puhtaista ainesosista, jotta se olisi vakaa ja luotettava jokaisessa kokeessa. PBS-liuoksemme osmolaarisuus ja ionipitoisuudet vastaavat hyvin ihmiskehon arvoja, minkä ansiosta se on isotoninen ja myrkytön useimmille soluille. PBS-liuoksemme koostumus PBS-liuoksemme on pH-säädelty seos ultrapuhtaista fosfaattipuskureista ja suolaliuoksista. 1X-käyttöpitoisuudessa se sisältää: • 8000 mg/l natriumkloridia (NaCl) • 200 mg/l kaliumkloridia (KCl) • 1150 mg/l vedetöntä dibasiista natriumfosfaattia (Na₂HPO₄) • 200 mg/l vedetöntä yksibasista kaliumfosfaattia (KH₂PO₄) Tämä koostumus takaa optimaalisen pH-arvon ja ionitasapainon, mikä sopii monenlaisiin biologisiin sovelluksiin. PBS-liuoksemme käyttökohteet PBS-liuoksemme sopii erinomaisesti moniin biologisen tutkimuksen sovelluksiin. Sen isotoniset ja myrkyttömät ominaisuudet tekevät siitä sopivan aineiden laimentamiseen ja soluviljelyastioiden huuhteluun. EDTA:ta sisältävät PBS-liuokset ovat tehokkaita kiinnittyneiden ja kasautuneiden solujen irrottamiseen. PBS:ään ei kuitenkaan tule lisätä kaksivalenteisia metalleja, kuten sinkkiä, sillä se voi aiheuttaa saostumista. Tällaisissa tapauksissa suositellaan Goodin puskureita. Lisäksi PBS-liuoksemme on hyväksyttävä vaihtoehto viruskuljetusväliaineelle RNA-virusten, mukaan lukien SARS-CoV-2, kuljetuksessa ja säilytyksessä. Laadunvalvonta • Steriilisuodatettu Säilytys ja säilyvyysaika • Säilytä +2 °C – +25 °C:ssa, valolta suojattuna. • Avattuna säilytä 2–25 °C:ssa ja käytä 24 kuukauden kuluessa. Kuljetusolosuhteet • Ympäristön lämpötila Säilytys • Säilytä jääkaapissa +2 °C – +8 °C:ssa pimeässä. Vältä jäätymistä ja toistuvaa lämmittämistä +37 °C:seen, sillä se heikentää tuotteen laatua. • Älä lämmitä elatusainetta yli 37 °C:n lämpötilaan tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltouuneja. • Jos vain osa elatusaineesta käytetään, ota tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpötilaan ennen käyttöä. Koostumus Luokka Ainesosat Pitoisuus (mg/l) Suolat Kaliumkloridi 200 Yksibasinen vedetön kaliumfosfaatti 200 Natriumkloridi 8000 Kaksibasinen natriumfosfaatti, vedetön 1150

€20.00

ilman veroja ja toimituskuluja

RPMI 1640, pitoisuus: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, pitoisuus: 2,0 g/l NaHCO₃

RPMI 1640 -kasvatusliuos, joka tunnetaan myös nimellä RPMI-kasvatusliuos, on erittäin monipuolinen soluviljelyliuos, jota käytetään laajalti biologisessa tutkimuksessa erilaisten nisäkkääsolujen viljelyyn. George E. Moore, Robert E. Gerner ja H. Addison Franklin kehittivät tämän elatusaineen vuonna 1966 tunnetussa Roswell Park Comprehensive Cancer Centerissä, ja se on saanut nimensä alkuperäpaikkansa, Roswell Park Memorial Institute (RPMI), mukaan. Alun perin RPMI 1640 -kasvatusliuos suunniteltiin tukemaan ihmisen leukemiasolujen kasvua sekä suspensio- että yksikerrosviljelmissä, mutta tutkijoiden ja kaupallisten toimittajien tekemien muutosten myötä se on kehittynyt sopivaksi monenlaisille nisäkässoluille. Se sopii erinomaisesti esimerkiksi HeLa-, Jurkat-, MCF-7-, PC12- ja PBMC-solulinjoille sekä astrosyytteille ja karsinoomille. RPMI 1640 -kasvatusliuos erottuu muista soluviljelyliuoksista ainutlaatuisen koostumuksensa ansiosta. Se sisältää huomattavan määrän fosfaattia, aminohappoja ja vitamiineja. Erityisesti se sisältää biotiinia, B12-vitamiinia ja PABA:ta, joita ei esiinny Eagle’s Minimal Essential Medium -liuoksessa tai Dulbecco’s Modified Eagle Medium -liuoksessa. Lisäksi RPMI 1640 -kasvatusliuoksessa on huomattavasti korkeammat inositolin ja koliinin pitoisuudet. Se ei kuitenkaan sisällä proteiineja, lipidejä tai kasvutekijöitä. Tämän vuoksi solujen kasvulle optimaalisten olosuhteiden aikaansaamiseksi tarvitaan yleensä 10-prosenttista naudan sikiöseerumia (FBS). RPMI 1640 -kasvatusliuoksen puskurointijärjestelmä perustuu natriumbikarbonaattiin, ja fysiologisesti sopivan pH-arvon ylläpitämiseksi tarvitaan 5–10 %:n CO₂-pitoisuutta. Pelkistysaineen glutationin lisääminen erottaa tämän kasvatusliuoksen entisestään muista. Laadunvalvonta • Steriilisuodatettu Säilytys ja säilyvyysaika • Säilytä +2–+8 °C:ssa, valolta suojattuna. • Avattuna säilytä 4 °C:ssa ja käytä 6–8 viikon kuluessa. Kuljetusolosuhteet • Ympäristön lämpötila Säilytys • Säilytä jääkaapissa +2 °C – +8 °C:ssa pimeässä. Vältä jäätymistä ja toistuvaa lämmittämistä +37 °C:seen, sillä se heikentää tuotteen laatua. • Älä lämmitä elatusainetta yli 37 °C:n lämpötilaan tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä, kuten mikroaaltouuneja. • Jos vain osa elatusaineesta käytetään, ota tarvittava määrä ja lämmitä se huoneenlämpötilaan ennen käyttöä. Koostumus Luokka Ainesosat Pitoisuus (mg/l) Aminohapot Glysiini 10,00 L-alanyyli-L-glutamiini 434,40 L-arginiini 200,00 L-asparagiiniH2O 56,82 L-asparagiinihappo 20,00 L-kystiini 2HCl 65,20 L-glutamiinihappo 20,00 L-histidiini-HCl-H₂O 20,27 L-hydroksi-L-proliini 20,00 L-isoleusiini 50,00 L-leusiini 50,00 L-lysiini-HCl 40,00 L-metioniini 15,00 L-fenyylialaniini 15,00 L-proliini 20,00 L-seriini 30,00 L-treoniini 20,00 L-tryptofaani 5,00 L-tyrosiini 2Na2H2O 28,83 L-valiini 20,00 Vitamiinit p-aminobentsoehappo 1,00 D-biotiini 0,20 Koliinikloridi 3,00 D-kalsiumpantotenaatti 0,25 Foolihappo 1,00 myo-inositoli 35,00 Nikotiiniamidi 1,00 Pyridoksiini-HCl 1,00 Riboflaviini 0,20 Tiamiini-HCl 1,00 B12-vitamiini 0,005 Epäorgaaniset suolat Ca(NO₃)₂·4H₂O 100,00 KCl 400,00 MgSO₄7H₂O 100,00 NaCl 6000,00 NaHCO₃ 2000,00 Na₂HPO₄ 800,00 Muut komponentit D-glukoosi 2000,00 Pelkistetty L-glutationi 1,00 Fenolipunaisen natriumsuola 5,30

€25.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Cytion Skeletal muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850082

Luustolihassolujen kasvualusta

Luustolihassolujen kasvualusta ylläpitää ihmisen luustolihasmyoblastien lisääntymistä ja estää ennenaikaisen fuusion, jolloin soluja voidaan viljellä ennen erilaistumista. Täydellinen kasvualusta sisältää sikiön vasikan seerumia, L-glutamiinia, fetuiinia, EGF:ää, bFGF:ää, ihmisen rekombinanttia insuliinia ja deksametasonia. Myotubien fuusioimiseksi siirry käyttämään luustolihassolujen erilaistumismediaa. Tarjoamme mediaa 500 ml:n perusmediana, joko yksinään tai yhdessä lisäaineiden kanssa, joko yksittäisinä komponentteina tai valmiiksi sekoitettuna lisäaineseoksena (Supplement-Mix). Yksittäisten komponenttien avulla yksittäisiä tekijöitä voidaan säätää tai jättää pois, kun taas lisäaineseos lisätään yhdellä kertaa. Lisäaineet ovat välttämättömiä käytön kannalta, ja molemmat lisäainemuodot ovat saatavilla myös erikseen. Lisäaineiden lisäämisen jälkeen täydellinen elatusaine sisältää 5 % FCS:ää (25 ml / 500 ml perusliuosta).

€210.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Cytion Smooth muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850075

Sileiden lihassolujen kasvualusta

Sileälihassolujen kasvualustaa käytetään verisuonikudoksesta ja muusta kudoksesta, kuten aortasta, sepelvaltimoista ja keuhkovaltimoista, keuhkoputkista, henkitorvesta ja virtsarakosta peräisin olevien ihmisen sileälihassolujen viljelyyn. Valmis kasvualusta sisältää sikiön vasikan seerumia, L-glutamiinia, EGF:ää, bFGF:ää ja ihmisen rekombinanttia insuliinia. Tarjoamme elatusainetta 500 ml:n perusliuoksena, joko yksinään tai yhdessä lisäaineiden kanssa, joko yksittäisinä komponentteina tai valmiiksi sekoitettuna lisäaineseoksena (Supplement-Mix). Yksittäisten komponenttien avulla yksittäisiä tekijöitä voidaan säätää tai jättää pois, kun taas lisäaineseos lisätään yhdellä kertaa. Perusliuosta on saatavana myös fenolipunavapaana samoissa pakkauskokoissa, mikä estää häiriöt fluoresenssi- ja kolorimetrisissä mittauksissa sekä fenolipunavärin heikon estrogeenin kaltaisen vaikutuksen. Lisäaineet ovat välttämättömiä käytön kannalta, ja molemmat lisäainevaihtoehdot ovat saatavana myös erikseen. Lisäaineiden lisäämisen jälkeen valmis elatusaine sisältää 5 % FCS:ää (25 ml / 500 ml perusliuosta).

€240.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Sodium Pyruvate Solution (100 mM)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Sodium Pyruvate Solution (100 mM) is a sterile, ready-to-use supplement designed to provide an additional, easily accessible energy source for cell culture media. Sodium pyruvate plays a key role in cellular energy metabolism and supports the growth of metabolically active and rapidly proliferating cells, such as tumor cells. Supplementation can enhance cell viability and help maintain metabolic stability in culture systems. Application and Benefits This solution is widely used in routine cell culture to enrich media with pyruvate and promote optimal growth conditions. It supports ATP production, may help reduce oxidative stress, and contributes to improved metabolic performance of cultured cells. Manufactured in cell culture–grade water and sterile-filtered, the product ensures consistent quality and reproducibility in research workflows. Usage and Compatibility The recommended final concentration for most cell culture applications is 1 mM sodium pyruvate, achieved by diluting the 100 mM stock solution 1:100 into complete culture medium. The solution is compatible with a wide range of basal media and mammalian cell lines. Store at +2°C to +8°C and protect from contamination to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€18.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

ilman veroja ja toimituskuluja

Soluviljelyalustat: yleiskatsaus

Elämäntieteiden alalla yksi tärkeimmistä menetelmistä on soluviljely. Soluviljelyllä tarkoitetaan solujen, kudosten tai elinten poistamista eläimestä tai kasvista ja niiden siirtämistä keinotekoiseen ympäristöön, joka on suotuisa niiden selviytymiselle ja/tai kasvulle. Solujen optimaalisen kehityksen kannalta olennaisia ympäristötekijöitä ovat säädelty lämpötila, solujen kiinnittymiselle sopiva substraatti, asianmukainen kasvualusta sekä inkubaattori, joka ylläpitää optimaalista pH-arvoa ja osmolaliteettia. Solujen on saatava nämä olosuhteet, jotta ne voivat kasvaa täyteen potentiaaliinsa.

Sopivan kasvualustan valinta in vitro -viljelyä varten on soluviljelyn kriittisin ja samalla tärkein vaihe. Kasvualusta, jota kutsutaan myös viljelyalustaksi, on neste tai geeli, joka on muotoiltu edistämään organismien kehitystä mikroskooppisella, solutasolla tai kasvien kaltaisella tasolla. Solujen viljelyyn käytetty alusta sisältää usein riittävän määrän energiaa ja aineita, jotka säätelevät solusykliä. Viljelyalustan pääkomponentteja ovat aminohapot, vitamiinit, epäorgaaniset suolat, glukoosi ja seerumi. Seerumi lisätään alustaan, koska se toimii kasvutekijöiden, hormonien ja kiinnittymistekijöiden lähteenä. Ravinteiden tarjoamisen lisäksi alusta auttaa myös ylläpitämään pH- ja osmolaliteettitasoja.

Soluviljelyssä käytettävät elatusainetyypit

Sekä ihmisen että eläinten soluja voidaan kasvattaa joko keinotekoisessa tai synteettisessä elatusaineessa tai täysin luonnollisessa elatusaineessa, jota on täydennetty luonnollisilla aineilla. Seuraavassa esittelemme yleiskatsauksen nykyisin saatavilla olevista elatusainetyypeistä.

Luonnolliset elatusaineet

Luonnollisissa elatusaineissa on ainoastaan luonnollisessa tilassaan esiintyviä biologisia nesteitä. Luonnolliset elatusaineet ovat erittäin hyödyllisiä ja helppokäyttöisiä monenlaisten eläinsolutyyppien viljelyssä. Luonnollisten elatusaineiden tarkkojen koostumusten puutteellinen ymmärtäminen on tärkein tekijä, joka vaikuttaa luonnollisilla elatusaineilla saatujen tulosten heikkoon toistettavuuteen.

Keinotekoiset elatusaineet

Keinotekoisten tai synteettisten elatusaineiden valmistukseen kuuluu ravinteiden (sekä orgaanisten että epäorgaanisten), seerumiproteiinien, hiilihydraattien, kofaktoreiden, vitamiinien ja suolojen sekä O2- ja CO2-kaasuvaiheiden lisääminen [1].

Erilaisia keinotekoisia elatusaineita on kehitetty täyttämään yksi tai useampi seuraavista tehtävistä: 1) Välitön eloonjääminen (tasapainoinen suolaliuos, jonka pH ja osmoottinen paine on tarkasti säädetty). 2) Pitkäaikainen eloonjääminen (tasapainoinen suolaliuos, johon on lisätty erilaisia orgaanisten kemikaalien ja/tai seerumin yhdistelmiä). 3) Määrittelemätön kehitys. 4) Erikoistoiminnot.

Keinotekoiset elatusaineet luokitellaan neljään ryhmään:

Seerumia sisältävät elatusaineet

Eläinsolujen viljelyyn käytettävissä elatusaineissa yleisimmin käytetty lisäaine on naudan sikiöseerumi. Sitä lisätään viljelyalustaan edullisena lisäaineena parhaiden mahdollisten kasvuolosuhteiden saavuttamiseksi. Sen lisäksi, että se toimii epästabiilien tai veteen liukenemattomien ravintoaineiden, hormonien ja kasvutekijöiden, proteaasi-inhibiittorien ja muiden aineiden kuljettajana tai kelatoijana, seerumi myös sitoo ja neutraloi haitallisia molekyylejä.

Seerumittomat elatusaineet

Seerumin läsnäololla elatusaineessa on useita haittoja, ja se voi aiheuttaa merkittäviä tulkintavirheitä immunologisessa tutkimuksessa [2, 3]. On kehitetty useita erilaisia seerumittomia elatusaineita [4, 5]. Nämä elatusaineet on yleensä kehitetty nimenomaan tukemaan yhden solutyypin viljelyä, kuten Thermo Fisher Scientificin Knockout Serum Replacement ja Knockout DMEM sekä Stem Cell Technologiesin mTESR-elatusaine [6], joka on tarkoitettu kantasoluille [7].

Lisäksi näihin elatusaineisiin on lisätty määriteltyjä määriä puhdistettuja kasvutekijöitä, lipoproteiineja ja muita proteiineja, joita muuten tyypillisesti saadaan seerumista [8]. Näitä elatusaineita kutsutaan usein ”määritellyiksi elatusaineiksi”, koska niiden koostumuksen komponentit tunnetaan hyvin.

Kemiallisesti määritellyt elatusaineet

Näihin elatusaineisiin kuuluu erittäin puhtaita epäorgaanisia ja orgaanisia komponentteja, joita ei ole saastuttanut minkäänlainen kontaminaatio. Niihin voi kuulua myös puhtaita proteiineja, kuten kasvutekijöitä.

Bakteerien tai hiivan geneettinen muuntaminen sekä tiettyjen rasvahappojen, vitamiinien, kolesterolin ja aminohappojen lisääminen johtaa niiden komponenttien tuotantoon [9].

Proteiinittomat elatusaineet

Proteiinittomat elatusaineet ovat sellaisia, jotka eivät sisällä lainkaan proteiinia, vaan ainoastaan muita kuin proteiini-aineosia. Verrattuna elatusaineisiin, joihin on lisätty seerumia, proteiinittomien elatusaineiden käyttö edistää solujen voimakkaampaa lisääntymistä ja proteiinin ilmentymistä sekä helpottaa loppuprosessissa syntyvän tuotteen puhdistamista [10–12]. Proteiinia ei sisälly esimerkiksi MEM- ja RPMI-1640-valmisteisiin. Proteiinilisää voidaan kuitenkin antaa, jos se on tarpeen.

Viljelyalustat ja niiden peruskomponentit

Kaupallisia viljelyalustoja on saatavana jauheena tai nesteenä, ja ne sisältävät usein erilaisia ravintoaineita, kuten aminohappoja, glukoosia, suoloja, vitamiineja ja muita ravintolisäaineita.

Näiden komponenttien tarve vaihtelee solulinjoittain, ja nämä vaihtelut selittävät viljelyalustojen laajan valikoiman. Jokaisella komponentilla on tietty tehtävä, jota kuvataan seuraavissa kappaleissa:

Puskurointijärjestelmät

Optimaalisten kasvuolosuhteiden ylläpitämiseksi pH:ta on säädettävä, mikä tapahtuu usein jommankumman seuraavista puskurointijärjestelmistä:

Luonnollinen puskurointijärjestelmä

Ilmakehän CO2/H2CO3-suhde on sama kuin elatusaineessa, mikä luo luonnollisen puskurointimekanismin. Luonnollisen puskurointimekanismin säilyttämiseksi viljelmät on pidettävä ilmakehässä, jossa CO2-pitoisuus on 5–10 %, mikä saavutetaan usein käyttämällä CO2-inkubaattoria. Yksi luonnollisen puskurin suurimmista eduista on sen edullisuus ja turvallisuus.

HEPES

Zwitterionia HEPES:ää käyttävä kemiallinen puskurointi on tehokkaampaa pH-alueella 7,2–7,4 eikä vaadi säädeltyä kaasuympäristöä. Tietyille solutyypeille suurempi HEPES-annos voi olla haitallista. HEPES:ää sisältävät elatusaineet ovat myös huomattavasti alttiimpia fluoresoivan valon fototoksisille vaikutuksille [13].

Fenolipunainen

pH-indikaattori fenolipunainen sisältyy usein kaupallisesti saatavilla oleviin viljelyalustoihin, mikä mahdollistaa pH:n jatkuvan seurannan. Solujen lisääntyessä niiden tuottamat metaboliitit aiheuttavat pH:n muutoksen ja siten alustan värinmuutoksen. Fenolipunaisella on kaksijakoinen vaikutus elatusaineen väriin: se muuttuu keltaiseksi happamassa pH:ssa ja purppuraksi emäksisessä pH:ssa. Soluviljelylle optimaalinen arvo, pH 7,4, saa elatusaineen näyttämään fluoresoivasti punaiselta.

Fenolipunaisella on kuitenkin muutamia haittoja: Ensinnäkin fenolipunainen kykenee jäljittelemään useiden steroidihormonien, pääasiassa estrogeenin, toimintaa [14]. Siksi tutkittaessa estrogeenille herkkiä soluja, kuten rintakudosta, suositellaan fenolipunaisesta vapaata elatusainetta. Fenolipunainen häiritsee natrium-kalium-tasapainoa useissa seerumittomissa valmisteissa. Tämän vaikutuksen voi kumota lisäämällä elatusaineeseen seerumia tai naudan aivolisäkkeen hormonia [15]. Kolmanneksi fenolipunainen haittaa havaitsemista virtaussytometrisissä kokeissa.

Epäorgaaniset suolat

Epäorgaanisia suoloja, kuten natrium-, kalium- ja kalsiumioneja, sisältävät elatusaineet auttavat ylläpitämään osmoottista tasapainoa ja säätelemään kalvopotentiaalia.

Aminohapot

Koska aminohapot ovat proteiinin peruskomponentteja, ne ovat olennainen osa jokaista koskaan kehitettyä solujen kasvualustaa. Koska solut eivät kykene tuottamaan tiettyjä aminohappoja itse, on tärkeää, että viljelyalustassa on välttämättömiä aminohappoja. Ne ovat välttämättömiä solujen lisääntymiselle, ja niiden pitoisuus määrää saavutettavissa olevan suurimman solutiheyden. Erityisesti välttämätön aminohappo L-glutamiini on erittäin tärkeä.

L-glutamiini toimii aineenvaihdunnan toissijaisena energialähteenä ja toimittaa typpeä NAD:n, NADPH:n ja nukleotidien tuotantoon. Koska L-glutamiini on epästabiili aminohappo, joka ajan myötä muuttuu muotoon, jota solut eivät pysty hyödyntämään, se on lisättävä elatusaineeseen.

Lisäksi kasvualustaan voidaan lisätä ei-välttämättömiä aminohappoja korvaamaan kasvun aikana kuluneita aminohappoja. Solujen kasvu kiihtyy ja niiden elinkelpoisuus paranee, kun kasvualustaa täydennetään ei-välttämättömillä aminohapoilla.

Hiilihydraatit

Sokereina esiintyvät hiilihydraatit ovat tärkein energialähde. Monissa elatusaineissa on glukoosin ja galaktoosin lisäksi myös maltoosia ja fruktoosia.

Proteiinit ja peptidit

Albumiini, transferriini ja fibronektiini ovat yleisimmin käytettyjä proteiineja ja peptidejä. Ne ovat erityisen tärkeitä elatusaineissa, jotka eivät sisällä seerumia. Albumiini, transferriini, aprotiniini, fetuiini ja fibronektiini ovat joitakin proteiineja, joita voi esiintyä seerumissa, joka on runsas proteiinin lähde.

Albumiini on veren pääasiallinen proteiini, ja sen tehtävänä on sitoa ja kuljettaa erilaisia aineita, kuten vettä, suoloja, vapaita rasvahappoja, hormoneja ja vitamiineja, eri elinten ja solujen välillä. Albumiinin kyky sitoutua kemikaaleihin tekee siitä tehokkaan vaihtoehdon haitallisten yhdisteiden poistamiseksi soluviljelyalustasta.

Aprotiniini on suoja-aine soluviljelyjärjestelmissä, sillä se on stabiili neutraalissa ja happamassa pH:ssa sekä kestää korkeita lämpötiloja ja proteolyyttisten entsyymien mahdollisesti aiheuttamaa hajoamista. Se kykenee estämään useita seriini-proteaaseja, muun muassa trypsiiniä.

Fetuini on glykoproteiini, jota voi esiintyä suurempina pitoisuuksina sikiöiden ja vastasyntyneiden eläinten seerumissa verrattuna aikuisten seerumiin. Lisäksi se toimii seriiniproteaasi-inhibiittorina. Fibronektiini-proteiini on olennainen osa solujen adheesioprosessia. Transferriini on rautaa kuljettava proteiini, joka vastaa raudan kuljettamisesta solujen kalvoihin.

Rasvahapot ja lipidit

Niillä on ratkaiseva rooli seerumittomassa elatusaineessa, kun seerumia ei ole läsnä.

Vitamiinit

Lukuisat vitamiinit ovat välttämättömiä solujen kehitykselle ja lisääntymiselle. Solut eivät pysty tuottamaan vitamiineja riittävissä määrissä, joten ne ovat välttämättömiä kudosviljelyssä ravintolisinä.

Soluviljelyssä seerumi on vitamiinien pääasiallinen lähde; viljelyalustoja kuitenkin rikastetaan myös erilaisilla vitamiineilla, jotta ne sopisivat tietylle solutyypille. Kasvun stimuloimiseen käytetään tyypillisimmin B-ryhmän vitamiineja.

Hivenaineet

Kemiallisia alkuaineita, kuten kuparia, sinkkiä, seleeniä ja trikarboksyylihapon välituotteita, kutsutaan hivenaineiksi. Hivenaineita lisätään usein seerumittomiin elatusaineisiin korvaamaan niitä, joita tyypillisesti esiintyy seerumissa. Nämä alkuaineet ovat tärkeitä kemiallisia komponentteja, joita tarvitaan terveen solun kehitykseen. Monet biokemialliset reaktiot, kuten entsyymien toiminta, riippuvat tietyistä mikroravinteista.

Elatusaineiden lisäaineet

Tiettyjen solulinjojen kasvulle suositeltava täydellinen kasvualusta vaatii lisäkomponentteja, joita ei ole peruskasvualustassa eikä seerumissa. Nämä ravintolisät tukevat solujen kasvua ja asianmukaista aineenvaihduntaa.

Vaikka hormonit, kasvutekijät ja signalointimolekyylit ovat välttämättömiä tiettyjen solulinjojen asianmukaiselle lisääntymiselle, seuraavia varotoimia on aina noudatettava: Koska lisäaineiden lisääminen saattaa muuttaa täydellisen kasvualustan osmolaliteettia, mikä voi estää solujen kehitystä, on aina suositeltavaa tarkistaa osmolaliteetti lisäaineiden lisäämisen jälkeen. Useimmille solulinjoille optimaalinen osmolaliteetti on välillä 260–320 mOSM/kg.

Antibiootit

Antibiootteja käytetään usein bakteeri- ja sienikontaminaatioiden estämiseen [16], vaikka ne eivät ole välttämättömiä solujen kasvulle. Koska antibiootit voivat peittää mykoplasma- ja resistenttien bakteerien aiheuttaman kontaminaation, niiden rutiinikäyttöä ei suositella soluviljelyssä [17, 18].

Lisäksi antibiootit voivat häiritä yliherkkien solujen aineenvaihduntaa. Usein käytetään MilliporeSigman ja Life Technologiesin valmistamia penisilliini-streptomysiini-yhdistelmiä. Plasmocinia on käytetty gliomasolulinjojen TS603, TS516 ja BT260 viljelyssä [19], ja sen on osoitettu olevan tehokas mykoplasmakontaminaation poistamisessa (20).

Seerumi

Seerumissa on albumiineja, kasvutekijöitä ja kasvun estäjiä. Seerumi on yksi soluviljelyalustan merkittävimmistä komponenteista, koska se tarjoaa aminohappoja, proteiineja, vitamiineja (erityisesti rasvaliukoisia vitamiineja, kuten A, D, E ja K), hiilihydraatteja, lipidejä, hormoneja, kasvutekijöitä, mineraaleja ja hivenaineita.

Sikiön ja vasikan seerumia käytetään usein viljeltyjen solujen kehityksen edistämiseen. Sikiön seerumi sisältää runsaasti kasvutekijöitä ja sopii solujen kloonaukseen sekä herkkien solujen kehittämiseen. Koska vasikan seerumin kasvua edistävät ominaisuudet ovat heikentyneet, sitä käytetään kontaktinestokokeissa. Tavalliset kasvualustat sisältävät usein 2–10 % seerumia. Seerumin lisääminen viljelyalustaan palvelee seuraavia tarkoituksia [21]:

Seerumi toimittaa soluille välttämättömiä ravintoaineita (sekä liuoksessa että proteiineihin sitoutuneina).
Seerumissa on useita kasvutekijöitä ja hormoneja, jotka osallistuvat kasvun edistämiseen ja solujen erityistoimintaan.
Se tarjoaa monia sitoutuvia proteiineja, kuten albumiinia ja transferriiniä, jotka kuljettavat muita kemikaaleja soluun. Esimerkiksi albumiini kuljettaa rasvoja, vitamiineja, hormoneja jne. soluihin.
Se tarjoaa myös proteiineja, kuten fibronektiiniä, jotka lisäävät solujen tarttumista substraattiin. Lisäksi se tuottaa leviämiselementtejä, jotka auttavat solujen laajenemisessa ennen jakautumista.
Se toimittaa proteaasi-inhibiittoreita, jotka estävät proteolyysin soluissa.
Se sisältää myös mineraaleja, kuten Na+, K+, Zn2+ ja Fe2+.
Se lisää väliaineen viskositeettia ja suojaa siten soluja mekaanisilta vaurioilta suspensiokulttuurin sekoituksen aikana.
Se toimii myös puskurina.

Viitteet

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Eläinsolujen ravitsemus kudosviljelyssä; alustavia tutkimuksia synteettisestä elatusaineesta. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1–8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Sikiön vasikan seerumin komponentin nopea adsorptio viljellyissä nisäkässoluissa. Mahdollinen artefaktien lähde solukohtaisia antigeenejä vastaan suunnattujen antiseerumien tutkimuksissa. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Seerumin lisääminen solususpensioiden valmistuksessa käytettyyn elatusaineeseen mahdollisena artefaktien lähteenä polvitaipeen imusolmuketestillä tutkituissa soluvälitteisissä reaktioissa. J Immunogenet. 1980;7:483–9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Kaupalliset seerumittomat elatusaineet: hybridomien kasvatus ja monoklonaalisten vasta-aineiden tuotanto. J Immunol Methods. 1991;145:175–83

[5] Barnes D, Sato G. Menetelmät viljeltyjen solujen kasvattamiseksi seerumittomassa elatusaineessa. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, ym. HSP70-kaperonit kuljettavat RNA:ta sisältämättömän TDP-43:n anisotrooppisiin, ytimen sisäisiin nestemäisiin pallomaisiin kuoriin. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, ym. Downin oireyhtymän aiheuttama ikääntyminen häiritsee hermosolujen esisolujen tumarakennetta. Cell Stem Cell. 2022;29:116–130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Seerumin täydellinen korvaaminen albumiinilla, transferriinillä ja soijalipidillä lipopolysakkaridille reagoivien B-lymfosyyttien viljelmissä. J Exp Med. 1978;147:923–33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Hybridomien kasvua ja monoklonaalisten vasta-aineiden tuotantoa varten kehitetyn kemiallisesti määritellyn proteiinittoman elatusaineen järjestelmällinen parantaminen. J Biotechnol. 1996;45:111–23

[10] Darfler F. Proteiiniton elatusaine hybridomien ja muiden immuunijärjestelmän solujen kasvattamiseen. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Seerumiton soluviljely: yhtenäistävä lähestymistapa. Cell. 1980;22:649–55

[12] Hamilton W, Ham R. Kiinalaisten hamsterisolulinjojen klonaalinen kasvatus proteiinittomissa elatusaineissa. In Vitro. 1977;13:537–47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Valolle altistetun HEPES-pitoisen viljelyväliaineen sytotoksisten vaikutusten analyysi. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282–7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenolipunainen kudosviljelyalustoissa on heikko estrogeeni: vaikutukset estrogeenille reagoivien solujen viljelytutkimukseen. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Seerumittomien elatusaineiden kehittäminen. Teoksessa: Master JRW, toim. Animal Cell culture, 3. painos. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Antibioottien käyttö soluviljelyalustoissa. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Soluviljelmien mykoplasma-infektioiden leviäminen ja torjunta. In Vitro. 1976;12:643–8

[18] Masters J, Stacey G. Elatusaineen vaihtaminen ja solulinjojen siirrostaminen. Nat Protoc. 2007;2:2276–84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, ym. Histonidemetylaasi KDM6A aistii suoraan happea säätääkseen kromatiinia ja solujen kohtaloa. Science. 2019;363:1217–1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, ym. Plasmocin™:n tehokkuus erilaisissa mollicute-bakteerien tartuttamissa nisäkässolulinjoissa verrattuna soluviljelyssä yleisesti käytettyihin antibiootteihin: paikallinen kokemus. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Ligandin sitoutumisen seerumialbumiiniin molekyylitason näkökohdat. Pharmacol Rev. 1981;33:17–53