AAV-293

La lignée cellulaire AAV-293 est une lignée permanente établie à partir de reins humains embryonnaires primaires transformés avec de l'ADN d'adénovirus humain de type 5. Les gènes codés par la région E1 de l'adénovirus (E1a et E1b) sont exprimés dans ces cellules et participent à la transactivation des promoteurs viraux, ce qui permet à ces cellules de produire des niveaux élevés de protéines.

L'AAV-293 est dérivé de la lignée cellulaire parentale 293. Grâce au clonage et à de multiples séries de tests, l'AAV-293 est spécifiquement sélectionné pour un niveau élevé de production d'AAV dans un système sans auxiliaires. Il offre plusieurs avantages par rapport aux cellules 293 ordinaires : Une plus grande surface cellulaire qui permet une meilleure transfection et un meilleur rendement d'AAV.

Les avantages sont une morphologie aplatie, un attachement ferme à la plaque de culture, et les cellules sont idéales pour la culture à grande échelle et la production d'AAV. Le virus adéno-associé (AAV) appartient à la famille des Parvoviridae, un groupe de virus parmi les plus petits des virus à ADN monocaténaire et non enveloppé.

Neuf sérotypes différents d'AAV ont été signalés à ce jour. L'AAV peut infecter des cellules en division ou non et peut se maintenir dans la cellule hôte humaine, ce qui permet d'envisager un transfert de gènes à long terme. L'AAV-2 recombinant est le sérotype le plus couramment utilisé pour la délivrance de gènes et peut être produit à des titres élevés avec un virus auxiliaire ou des cellules AAV-293.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie