AAV-293

Cellinjen AAV-293 är en permanent linje som etablerats från primär embryonal mänsklig njure som transformerats med DNA från humant adenovirus typ 5. De gener som kodas av E1-regionen i adenovirus (E1a och E1b) uttrycks i dessa celler och deltar i transaktivering av virala promotorer, vilket gör att dessa celler kan producera höga nivåer av protein.

AAV-293 härrör från den föräldralika 293-cellinjen, genom kloning och flera testomgångar är AAV-293 specifikt utvald för en hög nivå av AAV-produktion i ett hjälparfritt system. Den erbjuder flera fördelar jämfört med de vanliga 293-cellerna: Större cellyta resulterar i högre transfektion och bättre utbyte av AAV.

Fördelarna är en tillplattad morfologi, fast förankring på odlingsplattan och att cellerna är idealiska för storskalig odling och AAV-produktion. Adenoassocierat virus (AAV) tillhör familjen Parvoviridae, en grupp virus som tillhör de minsta av enkelsträngade och icke-höljda DNA-virus.

Det finns nio olika AAV-serotyper som rapporterats hittills. AAV kan infektera både delande och icke-delande celler och kan bibehållas i den mänskliga värdcellen, vilket skapar potential för långsiktig genöverföring. Rekombinant AAV-2 är den vanligaste serotypen som används vid genöverföring och kan produceras i höga titrar med hjälp av ett hjälparvirus eller AAV-293-celler.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring