AAV-293

Η κυτταρική σειρά AAV-293 είναι μια μόνιμη σειρά που δημιουργήθηκε από πρωτογενή εμβρυϊκό ανθρώπινο νεφρό μετασχηματισμένο με DNA ανθρώπινου αδενοϊού τύπου 5. Τα γονίδια που κωδικοποιούνται από την περιοχή Ε1 του αδενοϊού (Ε1α και Ε1β) εκφράζονται σε αυτά τα κύτταρα και συμμετέχουν στην ενεργοποίηση των ιικών υποκινητών, επιτρέποντας στα κύτταρα αυτά να παράγουν υψηλά επίπεδα πρωτεΐνης.

Ο AAV-293 προέρχεται από τη γονική σειρά κυττάρων 293, μέσω κλωνοποίησης και πολλαπλών γύρων δοκιμών, ο AAV-293 επιλέγεται ειδικά για υψηλό επίπεδο παραγωγής AAV σε σύστημα χωρίς βοηθητικό υλικό. Προσφέρει αρκετά πλεονεκτήματα σε σχέση με τα κανονικά κύτταρα 293: Μεγαλύτερη κυτταρική επιφάνεια με αποτέλεσμα υψηλότερη διαμόλυνση και καλύτερη απόδοση AAV.

Τα πλεονεκτήματα είναι η πεπλατυσμένη μορφολογία, η σταθερή προσκόλληση στην πλάκα καλλιέργειας και τα κύτταρα είναι ιδανικά για καλλιέργεια μεγάλης κλίμακας και παραγωγή AAV. Ο αδενο-συνδεδεμένος ιός (AAV) ανήκει στην οικογένεια των Parvoviridae, μια ομάδα ιών μεταξύ των μικρότερων από τους μονόκλωνους και μη περιτυλιγμένους ιούς DNA.

Μέχρι σήμερα έχουν αναφερθεί εννέα διαφορετικοί ορότυποι AAV. Οι AAV μπορούν να μολύνουν τόσο διαιρούμενα όσο και μη διαιρούμενα κύτταρα και μπορούν να διατηρηθούν στο ανθρώπινο κύτταρο ξενιστή, δημιουργώντας τη δυνατότητα μακροχρόνιας μεταφοράς γονιδίων. Ο ανασυνδυασμένος AAV-2 είναι ο πιο κοινός ορότυπος που χρησιμοποιείται στη μεταφορά γονιδίων και μπορεί να παραχθεί σε υψηλούς τίτλους με έναν βοηθητικό ιό ή κύτταρα AAV-293.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης