AAV-293

קו התאים AAV-293 הוא קו תאים קבוע שהוקם מתאי כליה עובריים ראשוניים של אדם שעברו שינוי באמצעות DNA של אדנו-וירוס מסוג 5. הגנים המקודדים על ידי אזור E1 של האדנו-וירוס (E1a ו-E1b) באים לידי ביטוי בתאים אלה ומשתתפים בהפעלה צולבת של מקדמי וירוסים, מה שמאפשר לתאים אלה לייצר רמות גבוהות של חלבון.

AAV-293 נגזר מקו התאים ההורי 293, באמצעות שיבוט וסבבים מרובים של בדיקות, AAV-293 נבחר במיוחד לרמת ייצור AAV גבוהה במערכת ללא עזרה. הוא מציע מספר יתרונות על פני תאי 293 הרגילים: שטח פנים גדול יותר של התא, מה שמביא לטרנספקציה גבוהה יותר ותפוקה טובה יותר של AAV.

היתרונות הם מורפולוגיה שטוחה, היצמדות איתנה לצלחת התרבית, והתאים אידיאליים לתרבית בקנה מידה גדול וייצור AAV. נגיף אדנו-אסוציאטיבי (AAV) שייך למשפחת Parvoviridae, קבוצת נגיפים מהקטנים ביותר מבין נגיפי ה-DNA החד-גדיליים וחסרי המעטפת.

עד היום דווח על תשעה סרוטיפים שונים של AAV. AAV יכול להדביק תאים מתחלקים ולא מתחלקים כאחד, וניתן לשמור אותו בתא המארח האנושי, מה שיוצר פוטנציאל להעברת גנים לטווח ארוך. AAV-2 רקומביננטי הוא הסרוטיפ הנפוץ ביותר המשמש להעברת גנים, וניתן לייצר אותו בריכוזים גבוהים באמצעות נגיף עוזר או תאי AAV-293.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו