AAV-293

AAV-293 rakuliin on alaline liin, mis on loodud inimese embrüonaalsetest neerudest, mis on transformeeritud inimese adenoviiruse 5. tüüpi DNA-ga. Adenoviiruse E1 piirkonna poolt kodeeritud geenid (E1a ja E1b) ekspresseeruvad nendes rakkudes ja osalevad viiruse promootorite transaktivatsioonis, mis võimaldab neil rakkudel toota suurel hulgal valku.

AAV-293 on saadud 293 vanemrakuliinist, kloonimise ja mitmete testimisvoorude kaudu on AAV-293 spetsiaalselt valitud kõrge AAV tootmise tasemega abivajavaba süsteemis. Sellel on tavapäraste 293 rakkude ees mitmeid eeliseid: Suurem raku pindala, mille tulemuseks on suurem transfektsioon ja parem AAV saagis.

Eelisteks on lamedam morfoloogia, kindel kinnitus kultuurplaadi külge ning rakud on ideaalsed suuremahuliseks kasvatamiseks ja AAV tootmiseks. Adeno-assotsieerunud viirused (AAV) kuuluvad parvoviiruste sugukonda, mis on väikseimate üheahelaliste ja ümbrikuta DNA-viiruste hulka kuuluv viiruste rühm.

Praeguseks on teatatud üheksast erinevast AAV serotüübist. AAV võib nakatada nii jagunevaid kui ka jagunemata rakke ja säilida inimese peremeesrakus, mis loob võimaluse pikaajaliseks geeniedastuseks. Rekombinantsed AAV-2 on kõige levinum serotüüp, mida kasutatakse geeniedastuses, ja seda saab toota kõrge tiitri juures koos abiviiruse või AAV-293 rakkudega.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest