AAV-293

A linha celular AAV-293 é uma linha permanente estabelecida a partir de rim humano embrionário primário transformado com ADN de adenovírus humano tipo 5. Os genes codificados pela região E1 do adenovírus (E1a e E1b) são expressos nestas células e participam na transactivação dos promotores virais, permitindo que estas células produzam níveis elevados de proteínas.

O AAV-293 é derivado da linha celular parental 293. Através da clonagem e de várias rondas de testes, o AAV-293 é especificamente selecionado para um elevado nível de produção de AAV num sistema sem auxiliares. Oferece várias vantagens em relação às células 293 normais: Maior área de superfície celular, resultando em maior transfecção e melhor rendimento de AAV.

As vantagens são uma morfologia achatada, uma fixação firme à placa de cultura e o facto de as células serem ideais para a cultura em grande escala e a produção de AAV. O vírus adeno-associado (AAV) pertence à família dos Parvoviridae, um grupo de vírus entre os mais pequenos dos vírus de ADN de cadeia simples e sem envelope.

Até à data, foram registados nove serótipos diferentes de AAV. Os AAV podem infetar tanto células em divisão como células que não se dividem e podem ser mantidos na célula hospedeira humana, criando o potencial para a transferência de genes a longo prazo. O AAV-2 recombinante é o serótipo mais comum utilizado na entrega de genes e pode ser produzido em títulos elevados com um vírus auxiliar ou células AAV-293.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia