AAV-293

AAV-293 šūnu līnija ir pastāvīga līnija, kas izveidota no primārās embrionālās cilvēka nieres, kas pārveidota ar cilvēka 5. tipa adenovīrusa DNS. Šajās šūnās tiek ekspresēti adenovīrusa E1 reģiona kodētie gēni (E1a un E1b), kas piedalās vīrusa promotoru transaktivācijā, ļaujot šīm šūnām ražot lielu olbaltumvielu daudzumu.

AAV-293 ir atvasināta no vecāku 293 šūnu līnijas, klonēšanas un vairāku testēšanas kārtu rezultātā AAV-293 ir īpaši atlasīta augstam AAV ražošanas līmenim sistēmā bez palīgvielām. Tai ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar parastajām 293 šūnām: Lielāka šūnu virsmas platība, kas nodrošina lielāku transfekciju un labāku AAV iznākumu.

Priekšrocības ir saplacināta morfoloģija, stingra piestiprināšanās pie kultūras plates, un šūnas ir ideāli piemērotas liela mēroga kultūrām un AAV ražošanai. Adenoasociētais vīruss (AAV) pieder Parvoviridae dzimtas vīrusu grupai, kas ir viena no mazākajām vienšūņaino un neapvalkoto DNS vīrusu grupām.

Līdz šim ir reģistrēti deviņi dažādi AAV serotipi. AAV var inficēt gan dalāmās, gan nedalāmās šūnas un var saglabāties cilvēka saimnieka šūnā, radot potenciālu ilgtermiņa gēnu pārnesei. Rekombinantais AAV-2 ir visizplatītākais serotips, ko izmanto gēnu pārnēsāšanai, un to var iegūt lielā titrā ar palīgvīrusu vai AAV-293 šūnām.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu