AAV-293

Celična linija AAV-293 je stalna linija, ki je nastala iz primarnih embrionalnih človeških ledvic, preoblikovanih z DNK človeškega adenovirusa tipa 5. V teh celicah se izražajo geni, ki jih kodira regija E1 adenovirusa (E1a in E1b), in sodelujejo pri transaktivaciji virusnih promotorjev, kar tem celicam omogoča proizvodnjo visokih ravni beljakovin.

AAV-293 izhaja iz starševske celične linije 293. S kloniranjem in več krogi testiranja je AAV-293 posebej izbran za visoko raven proizvodnje AAV v sistemu brez pomočnikov. V primerjavi z običajnimi celicami 293 ima več prednosti: Večja površina celic omogoča večjo transfekcijo in boljši izkoristek AAV.

Prednosti so sploščena morfologija, čvrsta pritrditev na gojitveno ploščo, celice pa so idealne za gojenje v velikem obsegu in proizvodnjo AAV. Adeno-asociirani virus (AAV) spada v družino Parvoviridae, skupino virusov, ki je med najmanjšimi enoverižnimi in neobvitimi virusi DNK.

Do zdaj so poročali o devetih različnih serotipih AAV. AAV lahko okuži deljive in nedeljive celice ter se lahko ohrani v človeški gostiteljski celici, kar omogoča dolgoročni prenos genov. Rekombinantni AAV-2 je najpogostejši serotip, ki se uporablja za prenos genov, in ga je mogoče proizvesti v visokih titrih s pomožnim virusom ali celicami AAV-293.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo