AAV-293

إن خط الخلايا AAV-293 هو خط دائم تم إنشاؤه من الكلى البشرية الجنينية الأولية المحولة بالحمض النووي للفيروس الغدي البشري من النوع 5. يتم التعبير عن الجينات المشفرة في منطقة E1 من الفيروس الغدي (E1a وE1b) في هذه الخلايا وتشارك في تنشيط المحفزات الفيروسية، مما يسمح لهذه الخلايا بإنتاج مستويات عالية من البروتين.

يتم اشتقاق AAV-293 من خط الخلايا الأبوية 293، من خلال الاستنساخ وجولات متعددة من الاختبارات، يتم اختيار AAV-293 خصيصًا لإنتاج مستوى عالٍ من إنتاج AAV في نظام خالٍ من الخلايا المساعدة. ويقدم العديد من المزايا مقارنةً بخلايا 293 العادية: مساحة أكبر لسطح الخلية مما يؤدي إلى نقل أعلى وإنتاجية أفضل من AAV.

وتتمثل المزايا في الشكل المسطح والتعلق القوي بصفيحة الاستزراع، كما أن الخلايا مثالية للاستزراع على نطاق واسع وإنتاج فيروس AAV. ينتمي الفيروس المرتبط بفيروسات الأدينو (AAV) إلى فصيلة فيروسات بارفوفيريدا، وهي مجموعة من الفيروسات من بين أصغر فيروسات الحمض النووي أحادية السلسلة وغير المغلفة.

هناك تسعة أنماط مصلية مختلفة لفيروس AAV تم الإبلاغ عنها حتى الآن. يمكن لفيروسات AAV أن تصيب الخلايا المنقسمة وغير المنقسمة على حد سواء، ويمكن الحفاظ عليها في الخلية البشرية المضيفة، مما يخلق إمكانية نقل الجينات على المدى الطويل. ويُعد فيروس AAV-2 المؤتلف هو النمط المصلي الأكثر شيوعاً المستخدم في توصيل الجينات، ويمكن إنتاجه بمعدلات عالية باستخدام فيروس مساعد أو خلايا AAV-293.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان