AAV-293

Dòng tế bào AAV-293 là dòng tế bào vĩnh viễn được thiết lập từ tế bào thận phôi người nguyên phát được biến đổi bằng DNA của vi-rút adenovirus loại 5 ở người. Các gen được mã hóa bởi vùng E1 của vi-rút adenovirus (E1a và E1b) được biểu hiện trong các tế bào này và tham gia vào quá trình kích hoạt chuyển gen của các trình tự khởi động vi-rút, cho phép các tế bào này sản xuất lượng protein cao.

AAV-293 được phát triển từ dòng tế bào 293 ban đầu, thông qua quá trình nhân bản và nhiều vòng thử nghiệm, AAV-293 được chọn lọc đặc biệt để sản xuất AAV ở mức cao trong hệ thống không cần tế bào trợ giúp. Nó có nhiều ưu điểm so với tế bào 293 thông thường: Diện tích bề mặt tế bào lớn hơn, dẫn đến hiệu suất chuyển gen cao hơn và sản lượng AAV tốt hơn.

Các ưu điểm bao gồm hình thái phẳng, bám chặt vào đĩa nuôi cấy và các tế bào lý tưởng cho nuôi cấy quy mô lớn và sản xuất AAV. Virus liên quan đến adenovirus (AAV) thuộc họ Parvoviridae, một nhóm virus thuộc loại nhỏ nhất trong số các virus DNA sợi đơn và không có vỏ bọc.

Đến nay đã có 9 serotype AAV khác nhau được báo cáo. AAV có thể nhiễm cả tế bào đang phân chia và không phân chia, và có thể duy trì trong tế bào chủ người, tạo tiềm năng cho việc chuyển gen lâu dài. AAV-2 tái tổ hợp là serotype phổ biến nhất được sử dụng trong chuyển gen, và có thể được sản xuất với titer cao bằng virus trợ giúp hoặc tế bào AAV-293.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.