AAV-293

AAV-293-cellelinjen er en permanent linje som er etablert fra primære embryonale humane nyrer som er transformert med humant adenovirus type 5-DNA. Genene som kodes av E1-regionen i adenovirus (E1a og E1b) uttrykkes i disse cellene og deltar i transaktivering av virale promotorer, noe som gjør at disse cellene kan produsere høye nivåer av protein.

AAV-293 er avledet fra den parentale 293-cellelinjen, og gjennom kloning og flere testrunder er AAV-293 spesifikt selektert for et høyt nivå av AAV-produksjon i et hjelperfritt system. Den har flere fordeler i forhold til de vanlige 293-cellene: Større celleoverflate gir høyere transfeksjon og bedre utbytte av AAV.

Fordelene er en flatere morfologi, godt feste til dyrkingsplaten, og cellene er ideelle for storskala dyrking og AAV-produksjon. Adenoassosierte virus (AAV) tilhører familien Parvoviridae, en gruppe virus som er blant de minste av de enkelttrådede og ikke-hylstrede DNA-virusene.

Det er hittil rapportert om ni forskjellige AAV-serotyper. AAV kan infisere både celler som deler seg og celler som ikke deler seg, og kan opprettholdes i den menneskelige vertscellen, noe som gir mulighet for langsiktig genoverføring. Rekombinant AAV-2 er den vanligste serotypen som brukes til genoverføring, og den kan produseres i høye titere med et hjelpevirus eller AAV-293-celler.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring