AAV-293

AAV-293 ląstelių linija yra nuolatinė linija, sukurta iš pirminių embrioninių žmogaus inkstų, transformuotų 5 tipo žmogaus adenoviruso DNR. Šiose ląstelėse išreiškiami adenoviruso E1 srities koduojami genai (E1a ir E1b), kurie dalyvauja viruso promotorių transaktyvavime, todėl šios ląstelės gali gaminti didelį kiekį baltymų.

AAV-293 yra išvesta iš tėvinės 293 ląstelių linijos, klonavimo ir daugkartinių bandymų metu AAV-293 yra specialiai atrinkta siekiant didelio AAV gamybos lygio sistemoje be pagalbininkų. Ji turi keletą privalumų, palyginti su įprastomis 293 ląstelėmis: Didesnis ląstelių paviršiaus plotas, dėl kurio padidėja transfekcija ir AAV išeiga.

Privalumai - plokščia morfologija, tvirtas prisitvirtinimas prie kultūros plokštelės, ląstelės idealiai tinka didelio masto kultūroms ir AAV gamybai. Adeno asocijuotas virusas (AAV) priklauso Parvoviridae šeimai, virusų grupei, kuri yra viena iš mažiausių viengrandinių ir neapgaubtų DNR virusų.

Iki šiol pranešta apie devynis skirtingus AAV serotipus. AAV gali užkrėsti tiek besidalijančias, tiek nesidalijančias ląsteles ir gali išlikti žmogaus ląstelėje-šeimininke, todėl atsiranda ilgalaikio genų perdavimo galimybė. Rekombinantinis AAV-2 yra dažniausiai genų perdavimui naudojamas serotipas, kuris gali būti gaminamas dideliais titrais su pagalbiniu virusu arba AAV-293 ląstelėmis.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime