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- Tissu
- Sein, glande mammaire
- Maladie
- Carcinome canalaire invasif
- Site métastatique
- Ductal
- Synonymes
- Bt-474, BT474
Documents
Cellules BT-474
Cell line · Référence du produit 300131
La BT-474 est une lignée cellulaire de cancer du sein humain, issue du carcinome canalaire d'une femme âgée de 60 ans. Cette lignée cellulaire est positive aux récepteurs d'œstrogènes et de progestérone...
Personnalisation / Recommandations
- Cellules BT-474Cell line€430.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
BT-474 est une lignée cellulaire humaine de cancer du sein, dérivée du carcinome canalaire d'une femme de 60 ans. Cette lignée cellulaire est positive aux récepteurs d'œstrogène et de progestérone, ce qui en fait un modèle précieux pour l'étude des cancers du sein répondant aux hormones. Les cellules BT-474 se caractérisent également par la surexpression de HER2/neu (récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain), une protéine amplifiée qui joue un rôle essentiel dans la pathogenèse et la progression de certains types agressifs de cancer du sein.
La lignée cellulaire BT-474 est largement utilisée en recherche oncologique pour étudier les mécanismes moléculaires de la prolifération du cancer du sein et pour tester des stratégies thérapeutiques ciblant les récepteurs hormonaux et la voie HER2. Ces cellules sont particulièrement utiles pour examiner l'efficacité des thérapies ciblant HER2, telles que le trastuzumab (Herceptin), et pour explorer les mécanismes de résistance à ces traitements. La lignée cellulaire a également contribué à des avancées dans la compréhension de la manière dont les manipulations hormonales affectent la croissance et la survie des cellules cancéreuses, ce qui permet d'envisager des approches thérapeutiques potentielles pour les tumeurs hormono-dépendantes.
- Tissu
- Sein, glande mammaire
- Maladie
- Carcinome canalaire invasif
- Site métastatique
- Ductal
- Synonymes
- Bt-474
- BT474
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Femme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Tumorigène
- Oui, sur des souris nues
- État du MSI
- Stable (MSS)
- Caryotype
- Mode = 55, intervalle = 50 à 112, décalage bimodal 58 - 59 et 100 dans les passages ultérieurs avec 3 chromosomes marqueurs
- Temps de doublement
- 60 à 80 heures
04Identifiants
- Référence
- BT-474 (numéro de catalogue Cytion 300131)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0179
05Expression et sensibilité
- Récepteurs exprimés
- HER-2/NEU+, ER+, PR+
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fréquence du phénotype Produit : 0.0426
- Profil mutationnel
- TP53 mut
- Sensibilité aux virus
- Virus de la tumeur mammaire de la souris (RIII-MuMTV)
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 10 microgrammes/ml d'insuline
- Repiquage
- Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Densité de semis
- 2 x 104 cellules/cm2 donneront une couche presque confluente en environ 4 jours.
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Récupération après le dégel
- Près de 100 % des cellules récupérées ont une viabilité supérieure à 90 %
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- 60 ans
- Origine ethnique
- Caucasien
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui