Премини към съдържанието
Клетки BT-474
Тъкан
Гърди, млечна жлеза
Заболяване
Инвазивен дуктален карцином
Място на метастазите
Дуктален
Синоними
Bt-474, BT474

Документи

Клетки BT-474

Cell line · Номер на продукта 300131

BT-474 е клетъчна линия на рак на гърдата при човека, получена от дуктален карцином на 60-годишна жена. Тази клетъчна линия е с естрогенни и прогестеронови рецептори...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

BT-474 е човешка клетъчна линия за рак на гърдата, получена от дуктален карцином на 60-годишна жена. Тази клетъчна линия е положителна за естрогенови и прогестеронови рецептори, което я прави ценен модел за изследване на хормонореактивни видове рак на гърдата. Клетките BT-474 се характеризират и със свръхекспресия на HER2/neu (човешки рецептор за епидермален растежен фактор 2) - белтък, който е амплифициран и играе решаваща роля в патогенезата и прогресията на някои агресивни видове рак на гърдата.

Клетъчната линия BT-474 се използва широко в онкологичните изследвания за изучаване на молекулярните механизми на пролиферацията на рака на гърдата и за тестване на терапевтични стратегии, насочени към хормоналните рецептори и пътя на HER2. Тези клетки са особено полезни за изследване на ефикасността на терапиите, насочени към HER2, като например трастузумаб (Herceptin), и за проучване на механизмите на резистентност към тези терапии. Клетъчната линия е допринесла и за напредъка в разбирането на това как хормоналните манипулации влияят върху растежа и оцеляването на раковите клетки, предоставяйки информация за потенциални подходи за лечение на хормонозависими тумори.

Тъкан
Гърди, млечна жлеза
Заболяване
Инвазивен дуктален карцином
Място на метастазите
Дуктален
Синоними
  • Bt-474
  • BT474

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки
Статус на MSI
Стабилен (MSS)
Кариотип
Режим = 55, диапазон = 50 до 112, бимодално изместване 58 - 59 и 100 в по-късните пасажи с 3 маркерни хромозоми
Време за удвояване
60 до 80 часа

04Идентификатори

Източник
BT-474 (каталожен номер 300131 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0179

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Изоензими
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Фенотип Честота на продукта: 0.0426
Мутационен профил
Мутация на TP53
Податливост към вируси
Миши туморен вирус на млечната жлеза (RIII-MuMTV)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 10 микрограма/ml инсулин
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/cm2 ще дадат предимно конфлуентен слой за около 4 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
Почти 100% възстановени клетки с >90% жизнеспособност
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
60 години
Етническа принадлежност
Кавказки