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Bt-474, BT474

BT-474 셀

Cell line · 제품 번호 300131

BT-474는 60세 여성의 유관암에서 유래한 인간 유방암 세포주입니다. 이 세포주는 에스트로겐 및 프로게스테론 수용체를...

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01일반 정보

설명

BT-474는 60세 여성의 유관 암종에서 유래한 인간 유방암 세포주입니다. 이 세포주는 에스트로겐과 프로게스테론 수용체 양성으로 호르몬 반응성 유방암을 연구하는 데 유용한 모델입니다. BT-474 세포는 또한 특정 공격적인 유형의 유방암의 발병과 진행에 중요한 역할을 하는 단백질인 HER2/neu(인간 표피 성장 인자 수용체 2)가 과발현되는 것이 특징입니다.

BT-474 세포주는 유방암 증식의 분자 메커니즘을 연구하고 호르몬 수용체와 HER2 경로를 표적으로 하는 치료 전략을 테스트하기 위해 종양학 연구에서 광범위하게 사용됩니다. 이 세포는 트라스투주맙(허셉틴)과 같은 HER2 표적 치료제의 효능을 조사하고 이러한 치료제에 대한 내성 메커니즘을 탐구하는 데 특히 유용합니다. 또한 이 세포주는 호르몬 조작이 암세포 성장과 생존에 미치는 영향을 이해하는 데 기여하여 호르몬 의존성 종양에 대한 잠재적 치료 접근법에 대한 통찰력을 제공했습니다.

티슈
유방, 유선
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동의어
  • Bt-474
  • BT474

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사
종양 유발성
예, 누드 마우스에서
MSI 현황
안정(MSS)
염색체형
모드 = 55, 범위 = 50~112, 바이모달 시프트 58 - 59 및 이후 구절에서 3개의 마커 염색체가 있는 100
배가 시간
60~80시간

04식별자

인용
BT-474(사이티온 카탈로그 번호 300131)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_0179

05발현 및 감수성

발현된 수용체
HER-2/NEU+, ER+, PR+
이소효소
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, 표현형 주파수 제품: 0.0426
돌연변이 프로파일
TP53 돌연변이
바이러스 감수성
마우스 유방 종양 바이러스(RIII-MuMTV)

06취급 및 배양

배지
DMEM:햄의 F12(1:1), w: 3.1 g/L 포도당, w: 2.5mM L-글루타민, w: 15mM HEPES, w: 0.5mM 피루브산 나트륨, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion 제품 번호 820400a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS, 10 마이크로그램/mL 인슐린을 보충합니다
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
2 x 10⁴ 세포/cm²는 약 4일 만에 대부분 융합된 층을 형성할 것이다
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
90% 이상의 생존율로 거의 100% 회수된 세포
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
60년
민족
백인