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BT-474 細胞
ティッシュ
乳房、乳腺
病気
浸潤性乳管がん
転移部位
乳管
同義語
Bt-474, BT474

BT-474 細胞

Cell line · 製品番号 300131

BT-474は、60歳の女性の乳管癌から樹立されたヒト乳がん細胞株である。この細胞株は、エストロゲン受容体およびプロゲステロン受容体が……

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01概要

説明

BT-474は、60歳女性の乳管癌に由来するヒト乳癌細胞株である。この細胞株はエストロゲンおよびプロゲステロン受容体陽性であり、ホルモン応答性乳癌を研究するための貴重なモデルとなっている。BT-474細胞はまた、HER2/neu(ヒト上皮成長因子受容体2)の過剰発現という特徴も持っている。HER2/neuは増幅されたタンパク質であり、ある種の侵攻性乳癌の病態と進行に重要な役割を果たしている。

BT-474細胞株は、乳癌増殖の分子メカニズムを研究し、ホルモン受容体およびHER2経路を標的とする治療戦略を試験するために、腫瘍学的研究で広く使用されている。これらの細胞は、トラスツズマブ(ハーセプチン)などのHER2標的療法の有効性を調べたり、これらの治療に対する耐性のメカニズムを探るのに特に有用である。この細胞株はまた、ホルモン操作が癌細胞の増殖と生存にどのような影響を与えるかを理解する上での進歩にも貢献しており、ホルモン依存性腫瘍に対する潜在的な治療アプローチへの洞察を与えている。

ティッシュ
乳房、乳腺
病気
浸潤性乳管がん
転移部位
乳管
同義語
  • Bt-474
  • BT474

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで
MSIの状態
安定(MSS)
核型
最頻値=55、範囲=50〜112、3マーカー染色体では58〜59と100の二峰性シフト。
倍増時間
60~80時間

04識別子

引用
BT-474 (Cytion カタログ番号 300131)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0179

05発現と感受性

発現している受容体
her-2/neu+、er+、pr+。
アイソザイム
G6PD、B、PGM3、1、PGM1、1、ES-D、1、Me-2、0、AK-1、1、GLO-1、1、表現型頻度積: 0.0426
変異プロファイル
TP53変異
ウイルス感受性
マウス乳腺腫瘍ウイルス(RIII-MuMTV)

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、10μg/mL インスリンを添加する。
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
2×10⁴細胞/cm²では、約4日でほぼコンフルエントな層が形成される
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
生存率90%以上の細胞をほぼ100%回収
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
60年
民族
白人