İçeriğe atla
BT-474 Hücreleri
Doku
Meme, meme bezi
Hastalık
İnvaziv duktal karsinom
Metastaz yeri
Duktal
Eş anlamlılar
Bt-474, BT474

BT-474 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300131

BT-474, 60 yaşındaki bir kadının duktal karsinomundan elde edilen bir insan meme kanseri hücre hattıdır. Bu hücre hattı, östrojen ve progesteron reseptörlerine...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

BT-474, 60 yaşındaki bir kadının duktal karsinomundan türetilen bir insan meme kanseri hücre hattıdır. Bu hücre hattı östrojen ve progesteron reseptörü pozitiftir, bu da onu hormona duyarlı meme kanserlerini incelemek için değerli bir model haline getirir. BT-474 hücreleri aynı zamanda bazı agresif meme kanseri türlerinin patogenezinde ve ilerlemesinde kritik bir rol oynayan ve amplifiye edilen bir protein olan HER2/neu'nun (insan epidermal büyüme faktörü reseptörü 2) aşırı ekspresyonu ile karakterize edilir.

BT-474 hücre hattı, meme kanseri proliferasyonunun moleküler mekanizmalarını incelemek ve hormon reseptörlerini ve HER2 yolunu hedef alan terapötik stratejileri test etmek için onkolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler özellikle trastuzumab (Herceptin) gibi HER2 hedefli tedavilerin etkinliğini incelemek ve bu tedavilere karşı direnç mekanizmalarını araştırmak için kullanışlıdır. Hücre hattı ayrıca hormonal manipülasyonların kanser hücresi büyümesini ve sağkalımını nasıl etkilediğinin anlaşılmasında ilerlemelere katkıda bulunarak hormona bağımlı tümörler için potansiyel tedavi yaklaşımlarına ilişkin içgörüler sağlamıştır.

Doku
Meme, meme bezi
Hastalık
İnvaziv duktal karsinom
Metastaz yeri
Duktal
Eş anlamlılar
  • Bt-474
  • BT474

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde
MSI durumu
Kararlı (MSS)
Karyotip
Mod = 55, aralık = 50 ila 112, bimodal kayma 58 - 59 ve 3 marker kromozomlu sonraki pasajlarda 100
İki katına çıkma süresi
60 ila 80 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
BT-474 (Cytion katalog numarası 300131)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
HER-2/NEU+, ER+, PR+
İzoenzimler
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotip Frekans Ürünü: 0.0426
Mutasyon profili
TP53 mut
Virüse karşı duyarlılık
Fare meme tümörü virüsü (RIII-MuMTV)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS, 10 mikrogram/mL İnsülin ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 x 104 hücre/cm2, yaklaşık 4 gün içinde çoğunlukla birleşik bir tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Neredeyse %100 geri kazanılmış hücreler >%90 canlılıkta
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
60 yıl
Etnik köken
Kafkas