Pāriet uz saturu
BT-474 šūnas
Audums
Krūtis, piena dziedzeris
Slimība
Invazīva duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
Bt-474, BT474

Dokumenti

BT-474 šūnas

Cell line · Preces numurs 300131

BT-474 ir cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no 60 gadus vecas sievietes duktālās karcinomas. Šī šūnu līnija ir estrogēna un progesterona receptoru...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BT-474 ir cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no 60 gadus vecas sievietes duktālās karcinomas. Šai šūnu līnijai ir pozitīvi estrogēnu un progesterona receptori, tāpēc tā ir vērtīgs modelis uz hormoniem reaģējoša krūts vēža izpētei. BT-474 šūnām ir raksturīga arī HER2/neu (cilvēka epidermālā augšanas faktora receptoru 2) - olbaltumvielas, kas ir pastiprināta un kurai ir būtiska nozīme dažu agresīvu krūts vēža veidu patoģenēzē un progresēšanā - hiperekspresija.

BT-474 šūnu līniju plaši izmanto onkoloģiskajos pētījumos, lai pētītu krūts vēža proliferācijas molekulāros mehānismus un pārbaudītu terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas pret hormonu receptoriem un HER2 ceļu. Šīs šūnas ir īpaši noderīgas, lai pārbaudītu HER2 mērķterapijas, piemēram, trastuzumaba (Herceptin), efektivitāti un izpētītu rezistences mehānismus pret šo terapiju. Šūnu līnija ir arī veicinājusi progresu izpratnē par to, kā hormonālās manipulācijas ietekmē vēža šūnu augšanu un izdzīvošanu, sniedzot ieskatu iespējamās hormonāli atkarīgo audzēju ārstēšanas pieejās.

Audums
Krūtis, piena dziedzeris
Slimība
Invazīva duktālā karcinoma
Metastāžu vieta
Duktāls
Sinonīmi
  • Bt-474
  • BT474

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
MSI statuss
Stabils (MSS)
Kariotips
Moduss = 55, diapazons = 50 līdz 112, bimodāla nobīde 58 - 59 un 100 vēlākajos piegājienos ar 3 marķieru hromosomām
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
60 līdz 80 stundas

04Identifikatori

Atsauce
BT-474 (Cytion kataloga numurs 300131)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM3, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotipu biežuma produkts: 0.0426
Mutāciju profils
TP53 mutācija
Jutība pret vīrusiem
Peles krūts audzēja vīruss (RIII-MuMTV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 10 mikrogramiem/ml insulīna
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2 veidos galvenokārt konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Gandrīz 100 % atgūto šūnu ar > 90 % dzīvotspēju
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
60 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis