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- Tessuto
- Seno, ghiandola mammaria
- Malattia
- Carcinoma duttale invasivo
- Sito metastatico
- Duttale
- Sinonimi
- Bt-474, BT474
Documenti
Cellule BT-474
Cell line · Codice prodotto 300131
La BT-474 è una linea cellulare di carcinoma mammario umano, derivata dal carcinoma duttale di una donna di 60 anni. Questa linea cellulare è positiva ai recettori degli estrogeni e del progesterone...
Personalizzazione / Suggerimenti
- Cellule BT-474Cell line€430.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
BT-474 è una linea cellulare di cancro al seno umano, derivata dal carcinoma duttale di una donna di 60 anni. Questa linea cellulare è positiva ai recettori per gli estrogeni e il progesterone, il che la rende un modello prezioso per lo studio dei tumori al seno ormono-responsivi. Le cellule BT-474 sono inoltre caratterizzate dalla sovraespressione di HER2/neu (recettore 2 del fattore di crescita epidermico umano), una proteina amplificata che svolge un ruolo critico nella patogenesi e nella progressione di alcuni tipi aggressivi di cancro al seno.
La linea cellulare BT-474 è ampiamente utilizzata nella ricerca oncologica per studiare i meccanismi molecolari della proliferazione del tumore al seno e per testare strategie terapeutiche mirate ai recettori ormonali e alla via di HER2. Queste cellule sono particolarmente utili per esaminare l'efficacia delle terapie mirate a HER2, come il trastuzumab (Herceptin), e per esplorare i meccanismi di resistenza a questi trattamenti. La linea cellulare ha anche contribuito a far capire come le manipolazioni ormonali influenzino la crescita e la sopravvivenza delle cellule tumorali, fornendo spunti per potenziali approcci terapeutici per i tumori ormono-dipendenti.
- Tessuto
- Seno, ghiandola mammaria
- Malattia
- Carcinoma duttale invasivo
- Sito metastatico
- Duttale
- Sinonimi
- Bt-474
- BT474
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tumorigenico
- Sì, in topi nudi
- Stato MSI
- Stabile (MSS)
- Cariotipo
- Modalità = 55, range = 50-112, spostamento bimodale 58-59 e 100 nei passaggi successivi con 3 cromosomi marker
- Tempo di raddoppio
- da 60 a 80 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- BT-474 (numero di catalogo Cytion 300131)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0179
05Espressione e suscettibilità
- Recettori espressi
- LEI-2/NEU+, ER+, PR+
- Isoenzimi
- G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0426
- Profilo mutazionale
- TP53 mut
- Suscettibilità ai virus
- Virus del tumore mammario del topo (RIII-MuMTV)
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, 10 microgrammi/mL di insulina
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- 2 x 104 cellule/cm2 produrranno uno strato prevalentemente confluente in circa 4 giorni.
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Quasi il 100% delle cellule recuperate con una vitalità >90%
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 60 anni
- Etnia
- Caucasico
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì