Langsung ke isi
Sel BT-474
Tisu
Payudara, kelenjar susu
Penyakit
Karsinoma duktal invasif
Lokasi metastasis
Ductal
Sinonim
Bt-474, BT474

Sel BT-474

Cell line · Nomor produk 300131

BT-474 adalah garis sel kanker payudara manusia yang diisolasi dari karsinoma duktal seorang wanita berusia 60 tahun. Garis sel ini memiliki reseptor estrogen dan progesteron...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

BT-474 adalah garis sel kanker payudara manusia, yang berasal dari karsinoma duktal seorang wanita berusia 60 tahun. Garis sel ini memiliki reseptor estrogen dan progesteron yang positif, sehingga menjadikannya model yang berharga untuk mempelajari kanker payudara yang responsif terhadap hormon. Sel BT-474 juga dicirikan oleh ekspresi berlebih dari HER2/neu (human epidermal growth factor receptor 2), protein yang diamplifikasi dan memainkan peran penting dalam patogenesis dan perkembangan beberapa jenis kanker payudara yang agresif.

Garis sel BT-474 banyak digunakan dalam penelitian onkologi untuk mempelajari mekanisme molekuler proliferasi kanker payudara dan untuk menguji strategi terapeutik yang menargetkan reseptor hormon dan jalur HER2. Sel-sel ini sangat berguna untuk menguji kemanjuran terapi yang menargetkan HER2, seperti trastuzumab (Herceptin), dan untuk mengeksplorasi mekanisme resistensi terhadap pengobatan ini. Garis sel ini juga berkontribusi pada kemajuan dalam memahami bagaimana manipulasi hormonal memengaruhi pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel kanker, memberikan wawasan tentang pendekatan pengobatan potensial untuk tumor yang bergantung pada hormon.

Tisu
Payudara, kelenjar susu
Penyakit
Karsinoma duktal invasif
Lokasi metastasis
Ductal
Sinonim
  • Bt-474
  • BT474

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang
Status MSI
Stabil (MSS)
Kariotipe
Modus = 55, rentang = 50 hingga 112, pergeseran bimodal 58 - 59 dan 100 pada bagian selanjutnya dengan 3 kromosom penanda
Waktu penggandaan
60 hingga 80 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
BT-474 (Nomor katalog Cytion 300131)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Ekspresi dan kerentanan

Reseptor yang diekspresikan
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Isoenzim
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produk Frekuensi Fenotipe: 0.0426
Profil mutasi
TP53 mut
Kerentanan terhadap virus
Virus tumor susu tikus (RIII-MuMTV)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS, 10 mikrogram/mL Insulin
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
2 x 10⁴ sel/cm² akan membentuk lapisan yang hampir padat dalam waktu sekitar 4 hari.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Hampir 100% sel yang dipulihkan dengan viabilitas >90%
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
60 tahun
Etnis
Kaukasia