Mine otse sisu juurde
BT-474 rakud
Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Ductal
Sünonüümid
Bt-474, BT474

Dokumendid

BT-474 rakud

Cell line · Toote number 300131

BT-474 on inimese rinnavähi rakuliin, mis on saadud 60-aastase naise duktaalse kartsinoomi rakkudest. See rakuliin on östrogeeni- ja progesterooniretseptor...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BT-474 on inimese rinnavähi rakuliin, mis on saadud 60-aastase naise ductus-kartsinoomist. See rakuliin on östrogeeni ja progesterooni retseptori suhtes positiivne, mis teeb sellest väärtusliku mudeli hormoonidele reageerivate rinnavähivormide uurimiseks. BT-474 rakke iseloomustab ka HER2/neu (inimese epidermise kasvufaktori retseptor 2) üleekspressioon, mis on amplifitseeritud ja mängib kriitilist rolli teatavate agressiivsete rinnavähi tüüpide patogeneesis ja progresseerumises.

BT-474 rakuliini kasutatakse laialdaselt onkoloogilistes uuringutes rinnavähi proliferatsiooni molekulaarmehhanismide uurimiseks ja hormoonretseptoritele ja HER2-rada suunatud ravistrateegiate testimiseks. Need rakud on eriti kasulikud HER2-le suunatud ravimeetodite, nagu trastuzumab (Herceptin), tõhususe uurimiseks ja nende ravimeetodite suhtes resistentsuse mehhanismide uurimiseks. Rakuliin on aidanud kaasa ka arusaamisele, kuidas hormonaalsed manipulatsioonid mõjutavad vähirakkude kasvu ja ellujäämist, andes ülevaate hormoonsõltuvate kasvajate võimalikest ravimeetoditest.

Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Invasiivne ductus kartsinoom
Metastaaside asukoht
Ductal
Sünonüümid
  • Bt-474
  • BT474

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Karyotüüp
Režiim = 55, vahemik = 50 kuni 112, bimodaalne nihe 58-59 ja 100 hilisemates lõigetes 3 marker-kromosoomi puhul
Kahekordistumisaeg
60-80 tundi

04Tunnused

Viide
BT-474 (Cytioni katalooginumber 300131)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Isoensüümid
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, fenotüübi sageduse toode: 0.0426
Mutatsiooniprofiil
TP53 mut
Viirusele vastuvõtlikkus
Hiirte rinnanäärmekasvaja viirus (RIII-MuMTV)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga, 10 mikrogrammi/ml insuliini
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2 annab umbes 4 päeva jooksul enamasti konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Peaaegu 100% taastunud rakkude elujõulisus >90%
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
60 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia