Preskoči na vsebino
Celice BT-474
Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Mesto metastaze
Duktalni
Sinonimi
Bt-474, BT474

Dokumenti

Celice BT-474

Cell line · Številka izdelka 300131

BT-474 je človeška celična linija raka dojke, pridobljena iz duktalnega karcinoma 60-letne ženske. Ta celična linija je receptorna za estrogen in progesteron...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

BT-474 je celična linija človeškega raka dojke, pridobljena iz duktalnega karcinoma 60-letne ženske. Ta celična linija je pozitivna na estrogenske in progesteronske receptorje, zato je dragocen model za preučevanje raka dojk, ki se odziva na hormone. Za celice BT-474 je značilna tudi prekomerna ekspresija HER2/neu (humanega receptorja za epidermalni rastni dejavnik 2), beljakovine, ki je pomnožena in ima ključno vlogo pri patogenezi in napredovanju nekaterih agresivnih vrst raka dojk.

Celična linija BT-474 se pogosto uporablja v onkoloških raziskavah za preučevanje molekularnih mehanizmov proliferacije raka dojk in za preizkušanje terapevtskih strategij, usmerjenih proti hormonskim receptorjem in poti HER2. Te celice so še posebej uporabne za preučevanje učinkovitosti terapij, usmerjenih na HER2, kot je trastuzumab (Herceptin), in za raziskovanje mehanizmov odpornosti na te terapije. Celična linija je prispevala tudi k napredku pri razumevanju, kako hormonske manipulacije vplivajo na rast in preživetje rakavih celic, kar omogoča vpogled v možne pristope zdravljenja hormonsko odvisnih tumorjev.

Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Invazivni duktalni karcinom
Mesto metastaze
Duktalni
Sinonimi
  • Bt-474
  • BT474

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših
Stanje MSI
Stabilno (MSS)
Kariotip
Način = 55, razpon = 50 do 112, bimodalni premik 58 - 59 in 100 v poznejših prehodih s 3 markerskimi kromosomi
Čas podvojitve
60 do 80 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
BT-474 (kataloška številka Cytion 300131)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Izoenzimi
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0426
Profil mutacij
TP53 mut
Občutljivost na virus
Virus tumorja dojk pri miših (RIII-MuMTV)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 10 mikrogramov/ml inzulina
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh ustvarilo večinoma konfluentno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Skoraj 100 % obnovljenih celic s > 90 % viabilnostjo
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
60 let
Etnična pripadnost
Kavkaški