Ir diretamente para o conteúdo
Células BT-474
Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
Bt-474, BT474

Documentos

Células BT-474

Cell line · Número do produto 300131

A BT-474 é uma linha celular de cancro da mama humana, derivada do carcinoma ductal de uma mulher de 60 anos. Esta linha celular é portadora de recetores de estrogénio e progesterona...

€430.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

BT-474 é uma linha celular de cancro da mama humano, derivada do carcinoma ductal de uma mulher de 60 anos. Esta linha celular é positiva para os receptores de estrogénio e progesterona, o que a torna um modelo valioso para o estudo dos cancros da mama responsivos às hormonas. As células BT-474 também se caracterizam pela sobreexpressão de HER2/neu (recetor 2 do fator de crescimento epidérmico humano), uma proteína que é amplificada e desempenha um papel crítico na patogénese e progressão de certos tipos agressivos de cancro da mama.

A linha celular BT-474 é amplamente utilizada na investigação oncológica para estudar os mecanismos moleculares da proliferação do cancro da mama e para testar estratégias terapêuticas que visam os receptores hormonais e a via HER2. Estas células são particularmente úteis para examinar a eficácia das terapias orientadas para o HER2, como o trastuzumab (Herceptin), e para explorar os mecanismos de resistência a estes tratamentos. A linha celular também contribuiu para os avanços na compreensão da forma como as manipulações hormonais afectam o crescimento e a sobrevivência das células cancerígenas, fornecendo informações sobre potenciais abordagens de tratamento para tumores dependentes de hormonas.

Tecido
Mama, glândula mamária
Doença
Carcinoma ductal invasivo
Local da metástase
Ductal
Sinónimos
  • Bt-474
  • BT474

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus
Estado do MSI
Estável (MSS)
Cariótipo
Modo = 55, intervalo = 50 a 112, desvio bimodal 58 - 59 e 100 em passagens posteriores com 3 cromossomas marcadores
Tempo de duplicação
60 a 80 horas

04Identificadores

Referência
BT-474 (número de catálogo Cytion 300131)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Isoenzimas
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Produto de frequência fenotípica: 0.0426
Perfil mutacional
TP53 mut
Susceptibilidade ao vírus
Vírus do tumor mamário do ratinho (RIII-MuMTV)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 10 microgramas/mL de insulina
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 x 104 células/cm² produzirão uma camada quase confluente em cerca de 4 dias.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Quase 100% de células recuperadas com viabilidade >90%
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
60 anos
Etnia
Caucasiano