Gå til innholdet
BT-474-celler
Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Duktal
Synonymer
Bt-474, BT474

Dokumenter

BT-474-celler

Cell line · Produktnummer 300131

BT-474 er en humant brystkreftcellelinje, avledet fra duktalt karsinom hos en 60 år gammel kvinne. Denne cellelinjen har østrogen- og progesteronreseptorer...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

BT-474 er en human brystkreftcellelinje som stammer fra et duktalt karsinom fra en 60 år gammel kvinne. Denne cellelinjen er østrogen- og progesteronreseptorpositiv, noe som gjør den til en verdifull modell for studier av hormonresponsive brystkreftformer. BT-474-celler kjennetegnes også av overuttrykk av HER2/neu (human epidermal vekstfaktorreseptor 2), et protein som er amplifisert og spiller en kritisk rolle i patogenesen og utviklingen av visse aggressive typer brystkreft.

BT-474-cellelinjen brukes i utstrakt grad i onkologisk forskning for å studere de molekylære mekanismene bak spredning av brystkreft og for å teste ut behandlingsstrategier rettet mot hormonreseptorer og HER2-banen. Disse cellene er spesielt nyttige for å undersøke effekten av HER2-målrettede behandlinger, som trastuzumab (Herceptin), og for å utforske mekanismer for resistens mot disse behandlingene. Cellelinjen har også bidratt til å øke forståelsen av hvordan hormonell manipulering påvirker kreftcellenes vekst og overlevelse, noe som gir innsikt i potensielle behandlingsmetoder for hormonavhengige svulster.

Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Invasivt duktalt karsinom
Metastaseområde
Duktal
Synonymer
  • Bt-474
  • BT474

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
MSI-status
Stabil (MSS)
Karyotype
Modus = 55, intervall = 50 til 112, bimodalt skift 58 - 59 og 100 i senere passasjer med 3 markørkromosomer
Fordoblingstid
60 til 80 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BT-474 (Cytion-katalognummer 300131)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Isoenzymer
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0426
Mutasjonsprofil
TP53 mut
Virusfølsomhet
Mamma-tumorvirus fra mus (RIII-MuMTV)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS, 10 mikrogram/mL insulin
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2 vil gi et stort sett sammenhengende lag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Nesten 100 % av cellene ble gjenvunnet med >90 % levedyktighet
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
60 år
Etnisitet
Kaukasisk