Gå direkte til indholdet
BT-474-celler
Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastasested
Duktal
Synonymer
Bt-474, BT474

Dokumenter

BT-474-celler

Cell line · Varenummer 300131

BT-474 er en human brystkræftcellelinje, der stammer fra et duktalt karcinom hos en 60-årig kvinde. Denne cellelinje er østrogen- og progesteronreceptor...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

BT-474 er en human brystkræftcellelinje, der stammer fra et duktalt karcinom fra en 60-årig kvinde. Denne cellelinje er østrogen- og progesteronreceptorpositiv, hvilket gør den til en værdifuld model til undersøgelse af hormonresponsive brystkræftformer. BT-474-celler er også karakteriseret ved overudtryk af HER2/neu (human epidermal vækstfaktorreceptor 2), et protein, der forstærkes og spiller en kritisk rolle i patogenesen og udviklingen af visse aggressive typer af brystkræft.

BT-474-cellelinjen bruges i vid udstrækning i onkologisk forskning til at undersøge de molekylære mekanismer for spredning af brystkræft og til at teste terapeutiske strategier rettet mod hormonreceptorer og HER2-stien. Disse celler er særligt nyttige til at undersøge effekten af HER2-målrettede behandlinger, såsom trastuzumab (Herceptin), og til at udforske mekanismer for resistens over for disse behandlinger. Cellelinjen har også bidraget til fremskridt i forståelsen af, hvordan hormonelle manipulationer påvirker kræftcellers vækst og overlevelse, hvilket giver indsigt i potentielle behandlingsmetoder for hormonafhængige tumorer.

Væv
Bryst, brystkirtel
Sygdom
Invasivt duktalt karcinom
Metastasested
Duktal
Synonymer
  • Bt-474
  • BT474

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus
MSI-status
Stabil (MSS)
Karyotype
Tilstand = 55, interval = 50 til 112, bimodalt skift 58 - 59 og 100 i senere passager med 3 markørkromosomer
Fordoblingstid
60 til 80 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
BT-474 (Cytion katalognummer 300131)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Isoenzymer
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0426
Mutationsprofil
TP53 mut
Virusfølsomhed
Brysttumorvirus fra mus (RIII-MuMTV)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 10 mikrogram/mL insulin
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2 vil give et næsten sammenhængende lag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Næsten 100 % gendannede celler med >90 % levedygtighed
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
60 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk